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30937747木蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
如何證明某個(gè)蛋白是否形成了復(fù)合體
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| 想請(qǐng)教一下,有哪些實(shí)驗(yàn)方法能夠證明一個(gè)蛋白有沒(méi)有自身聚合形成復(fù)合體?現(xiàn)在我表達(dá)了一個(gè)蛋白,但是不知道它是單體發(fā)生作用,還是形成了聚合體后發(fā)生作用,而且我想知道如果是聚合體,會(huì)是幾聚體。 |

新蟲(chóng) (初入文壇)
| 一般形成聚合體有可能是分子間的二硫鍵作用或分子間的作用力。要想知道是不是聚合體、是幾聚體,有很多種方法。最簡(jiǎn)單的方法就是跑個(gè)Native電泳,要是蛋白中有cys的話,樣品做加還原劑和不加還原劑對(duì)比,比較分子量就可以了;要是沒(méi)有cys,你可以加或不加SDS。還有就是你也可以用凝膠層析的方法看看有幾種組分,分子量分別是多少,不過(guò)前提是盡量不要有其他未知雜蛋白。 |
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