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30937747木蟲 (小有名氣)
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[求助]
如何證明某個蛋白是否形成了復(fù)合體
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| 想請教一下，有哪些實驗方法能夠證明一個蛋白有沒有自身聚合形成復(fù)合體？現(xiàn)在我表達(dá)了一個蛋白，但是不知道它是單體發(fā)生作用，還是形成了聚合體后發(fā)生作用，而且我想知道如果是聚合體，會是幾聚體。 |
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ljhjf2006
新蟲 (初入文壇)
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
30937747: 金幣+4, ★★★很有幫助, 能否說的詳細(xì)點？如果我加SDS，在Native上比不加SDS的分子量要小，就能證明形成的聚合體？但是也還分不清出是幾聚體吧？ 2013-01-22 18:00:54
小丹木木: 金幣+3, 鼓勵應(yīng)助 2013-04-24 13:35:30
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小丹木木: 金幣+3, 鼓勵應(yīng)助 2013-04-24 13:35:30
| 一般形成聚合體有可能是分子間的二硫鍵作用或分子間的作用力。要想知道是不是聚合體、是幾聚體，有很多種方法。最簡單的方法就是跑個Native電泳，要是蛋白中有cys的話，樣品做加還原劑和不加還原劑對比，比較分子量就可以了；要是沒有cys，你可以加或不加SDS。還有就是你也可以用凝膠層析的方法看看有幾種組分，分子量分別是多少，不過前提是盡量不要有其他未知雜蛋白。 |
2樓2013-01-22 17:36:53
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