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zd_seu金蟲 (小有名氣)
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薄膜法制備溫敏脂質(zhì)體,使用鈣黃綠素作為藥物模型,但是包封率很低,釋放也不符合
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如題,現(xiàn)在用DPPC和CHOL混合,制備溫度敏感的脂質(zhì)體,采用的是薄膜水化法,水化液是calcein(100mM) in PBS(10mM),使用的是高速離心(15000rpm,40min)重復(fù)三次,去除游離的鈣黃綠素。 然后分別在4攝氏度和41攝氏度下,進行釋放。 現(xiàn)有問題如下: 1.鈣黃綠素的包封率很低; 2.做出來的結(jié)果是:4攝氏度的釋放量反而略大于41攝氏度的釋放量(重復(fù)幾次都是這樣);而且用曲拉通破膜后,整體的熒光有一定的下降,趨勢很明顯。 我們組只有我一個人在做脂質(zhì)體,所以來到這里,希望知道的人,給我指點一下迷津。我初步懷疑是鈣黃綠素沒有包封進去,或者說包封率太低,試過一次逆向蒸發(fā)法,效果不是很好。是不是擠膜之后會好一點?一直沒有擠膜過,而且用探頭超聲減小粒徑,是否對其包封率也有影響。 我還嘗試過將鈣黃綠素的量減為0.1mM,然后不去除游離的鈣黃綠素,而是加入氯化鈷淬滅游離的鈣黃綠素?zé)晒猓跍y試釋放的時候,也是利用這個原理,但是做出來也沒有溫度相應(yīng)特性。 如果是沒有包進去,可能是哪一步出現(xiàn)的問題;如果是包封率太低,應(yīng)該怎么提高鈣黃綠素的包封率? 大家都來幫幫我吧,愁死了,每次開會都被老板罵的要死,求解救! |
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