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enuo123金蟲 (小有名氣)
淘哈哈
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[求助]
求土壤中分離細(xì)菌的具體方法
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| 各位大師，本人不是做微生物方面的，因需要帶本科生畢業(yè)設(shè)計(jì)，其中有關(guān)微生物的部分甚是煩惱，故在此一求。本人需要從土壤中分離出細(xì)菌，進(jìn)而進(jìn)行培養(yǎng)，用來后續(xù)做細(xì)菌抗菌性能的研究，因此在此拜求土壤中分離細(xì)菌，并將其進(jìn)行培養(yǎng)的具體方法，各位大俠有提點(diǎn)的意見建議都是好的，再就是我想問下，抗菌性能研究都是研究哪些方面呢？ |
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【答案】應(yīng)助回帖
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enuo123: 金幣+3 2013-06-19 10:09:58
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enuo123: 金幣+3 2013-06-19 10:09:58
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一、從土壤中分離放線菌 1.制作高氏一號培養(yǎng)基，趁熱注入培養(yǎng)皿中，凝成平板，待用。 2.稱取土壤10克，放入裝有100毫升無菌水的錐形瓶中，并加入10%酚10滴，以抑制細(xì)菌生長。振蕩10分鐘，制成10-1菌懸液。按照連續(xù)稀釋分離法，進(jìn)一步制成10-3菌懸液。 3.用移液管吸取0.1毫升10-3菌懸液，注入平板培養(yǎng)基上，用無菌玻璃刮刀將菌懸液均勻涂抹在整個(gè)培養(yǎng)基上。然后將培養(yǎng)皿倒置于25-30℃生化培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)7-10天，培養(yǎng)基上會出現(xiàn)微生物菌落。如果菌落的硬度較大，干燥致密，且與基質(zhì)緊密結(jié)合，不易被針挑起，這就是放線菌菌落。 4.挑取放線菌菌落，接種于斜面培養(yǎng)基上。 二、從土壤中分離霉菌 1.制作豆芽汗葡萄糖培養(yǎng)基，并添加80%乳酸數(shù)滴，以抑制細(xì)菌生長。將培養(yǎng)皿中，凝成平板，待用。 2.稱取10克土壤，按上述分離放線菌的方法制成10-4或10-5的菌懸液。 3.取0.1毫升菌懸液注入培養(yǎng)皿內(nèi)培養(yǎng)基上，用玻璃刮刀涂抹均勻。然后將培養(yǎng)皿倒置于25-30℃溫箱內(nèi)培養(yǎng)3-4天。培養(yǎng)基上會出現(xiàn)微生物菌落。霉菌菌落常長成絨狀、棉絮狀或蜘蛛網(wǎng)狀，可根據(jù)這一特征尋找霉菌菌落。 4.挑取培養(yǎng)皿內(nèi)的霉菌菌落接種于斜面培養(yǎng)基上。 |
4樓2013-02-27 14:31:18
zhangxingc
鐵桿木蟲 (著名寫手)
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【答案】應(yīng)助回帖
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laozuzunzhe: 金幣+2, 鼓勵應(yīng)助！ 2013-02-26 16:29:21
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這方面的文章很多，樓主可以檢索：土壤+菌種分離 按一個(gè)期刊論文的模式帶一個(gè)本科生的畢業(yè)論文，應(yīng)該是沒有問題的。 抑菌：主要測兩個(gè)內(nèi)容，一是看對哪些菌有抑制能力，如對致病菌；二是看抑菌能力的大小：可以用牛津法測抑菌環(huán)直徑，或是測被抑菌的生長濃度 |
2樓2013-02-26 15:52:13
【答案】應(yīng)助回帖
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zhang8826857: 金幣+5, 新蟲加油 2013-02-26 16:47:24
enuo123: 金幣+15, ★★★很有幫助, 給我提供了一個(gè)明確的方向，非常感謝！ 2013-02-27 09:25:50
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zhang8826857: 金幣+5, 新蟲加油 2013-02-26 16:47:24
enuo123: 金幣+15, ★★★很有幫助, 給我提供了一個(gè)明確的方向，非常感謝！ 2013-02-27 09:25:50
enuo123: 金幣+8 2013-06-19 10:09:45
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1.稱取5g土樣（濕重），加到含10ml無菌土樣浸出汁（土樣滅菌后用無菌水稀釋浸出液體）或提取液的250ml三角燒瓶內(nèi)； 2.26度，150~200r/min震蕩培養(yǎng)25min； 3.以適宜的樣本稀釋液系列稀釋培養(yǎng)液； 4.取3個(gè)適宜稀釋度的稀釋液0.1ml，涂布3組（每組3~4個(gè)）瓊脂平皿； 5.22~26度下皿底朝上培養(yǎng)4~10D，每D檢測一次平皿上菌落的形成情況。 培養(yǎng)濕度需根據(jù)原土樣濕度進(jìn)行調(diào)整，樣本的稀釋程度根據(jù)濁度來掌握，需注意是大黏土的成分衣使?jié)岫让黠@增高。 |
3樓2013-02-26 16:28:40
進(jìn)步一點(diǎn)點(diǎn)
至尊木蟲 (知名作家)
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5樓2013-02-28 23:56:49
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