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趙建雪銀蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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[求助]
這幾個(gè)方法的公式是什么，急求
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略做改動(dòng)，將 10 個(gè)果的果皮切碎充分混合，取 0.5 g 鮮樣放入 10 ml 1% HCl 甲醇溶液室溫黑暗中浸提 2h。用分光光度計(jì)測(cè)定提取液在 553 nm 和 600 nm 處的吸光值，二者之差即為花青苷的相對(duì)含量。差值每增加 0.01 定義為一個(gè)單位 U。設(shè) 3~5 次取樣重復(fù)。單位u/g.FW PAL 活性測(cè)定：取 0.5ml 酶液加入 2.5ml 的反應(yīng)液 [硼酸緩沖液 （pH8.8），0.01M 苯丙氨酸]，在 34oC 反應(yīng) 30min 后用 0.5ml 35%（W/V） 的三氯乙酸終止反應(yīng)，在 5,000g 離心 5min 除去變性的蛋白質(zhì)。反應(yīng)生成 的肉桂酸含量用在 290nm 處的吸光值來(lái)表示。每分鐘光密度變化 0.001 所 需的酶量為 1 單位。對(duì)照實(shí)驗(yàn)用不加苯丙氨酸的反應(yīng)液代替正常的反應(yīng)液 進(jìn)行。單位同上 CHI 活性測(cè)定： 2’，4，4，6’-四氫苯基苯乙烯酮的合成由柚皮素加 入 50% KOH 后酸化，然后用乙醇進(jìn)行重結(jié)晶備用。取 0.75ml 的酶提液加 入 2ml 下列混合液[50mM Tris-HCl，pH7.4，牛血清蛋白 7.5mg/ml，50mM KCN]，然后加 50μl 1mg/ml 的查爾酮溶液，在 34oC 水浴 30min，另取同 量的酶提液沸水浴 10min 為對(duì)照，測(cè)定在 381nm 波長(zhǎng)處的吸光值的變化 來(lái)表示 CHI 的酶活性。每分鐘光密度變化 0.001 所需的酶量為 1 單位。單位同上。 此外有沒(méi)有測(cè)ANS活性的方法 |
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趙建雪
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