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CHO細(xì)胞真核表達(dá)怎么總是假克隆呢
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| CHO細(xì)胞的真核表達(dá)，采用了CMV，PCI以及pCDNA5三種載體，轉(zhuǎn)染后48小時(shí)免疫熒光檢測(cè)有表達(dá)，問什么加壓后雖然有圓形的細(xì)胞克隆產(chǎn)生，但是在進(jìn)行免疫熒光檢測(cè)卻沒有目的蛋白的表達(dá)呢，畢業(yè)在即，怎么辦呢? |
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2樓2013-02-28 02:07:31
3樓2013-02-28 10:05:36
4樓2013-03-01 01:13:03
5樓2013-03-01 21:44:27
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
yuanalice: 金幣+3, ★★★很有幫助 2013-03-04 08:42:17
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
yuanalice: 金幣+3, ★★★很有幫助 2013-03-04 08:42:17
| kozak 序列是很重要，但是你也可以先去查一下你的基因序列（包括質(zhì)粒圖譜），因?yàn)橛械臅r(shí)候，基因插入你的質(zhì)粒之后，就已經(jīng)有了Kozak序列，而且我覺得kozak 只是影響表達(dá)量高低而不是影響表達(dá)量有無。按照ｌｚ的描述，你是瞬時(shí)轉(zhuǎn)染之后檢測(cè)有目的蛋白，但是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染之后就沒有了？ |
6樓2013-03-02 16:06:34
7樓2015-05-07 13:31:38
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