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司徒玉兒鐵蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
關(guān)于AML12細(xì)胞的培養(yǎng)問(wèn)題 已有1人參與
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老板讓養(yǎng)AML12，以前課題組里從沒(méi)養(yǎng)過(guò)，去ATCC官網(wǎng)看了些相關(guān)資料，發(fā)現(xiàn)了幾個(gè)問(wèn)題： 1.官網(wǎng)的培養(yǎng)基配方中沒(méi)有雙抗，要加雙抗嗎？加多少？ 2.AML-12適宜生長(zhǎng)的PH是多少？配好的培養(yǎng)基需要調(diào)PH嗎？ 3.官網(wǎng)上關(guān)于其傳代時(shí)說(shuō)先要用胰酶簡(jiǎn)單沖洗細(xì)胞以清除血清中胰酶抑制劑的影響，那沖洗之后要將胰酶倒掉嗎？還是沖洗之后直接再加胰酶消化？另外怎么操作才算是簡(jiǎn)單沖洗（它后面又說(shuō)為避免細(xì)胞聚集不能搖晃和振動(dòng)細(xì)胞）？還有，需要用PBS沖細(xì)胞嗎？換液的時(shí)候要用PBS沖嗎？ 4.不能吹打，搖晃細(xì)胞，只靠胰酶消化，能讓細(xì)胞完全從貼壁狀態(tài)變成懸浮液?jiǎn)�？如果不能，該如何操作�?br /> 最后，想問(wèn)下這個(gè)細(xì)胞好養(yǎng)嗎？還有其他什么需要注意的地方嗎？ 謝謝各位~~~ |
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【答案】應(yīng)助回帖
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kx444555: 金幣+3, 鼓勵(lì)交流 2014-02-17 10:02:16
kx444555: 金幣+3, 鼓勵(lì)交流 2014-02-17 10:02:16
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雙抗加1% 使用的培養(yǎng)基pH一般在7.2~7.4左右 沖洗后的胰酶倒掉，死細(xì)胞多時(shí)用PBS沖洗，簡(jiǎn)單沖洗就是搖晃一下就行 消化時(shí)細(xì)胞開(kāi)始漂時(shí)就可以加入含血清的培養(yǎng)基終止消化了，只要時(shí)間夠長(zhǎng)都能消化到這種狀態(tài) 最后，求助AML12這株細(xì)胞，實(shí)驗(yàn)需要，但找不到種，望支援！不勝感激！ mail: miaohui@sina.cn急盼回音 |
2樓2014-02-16 22:15:15
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