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jiapingshk銅蟲 (初入文壇)
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[求助]
蛋白純化
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| 我用鎳柱純化下來的蛋白在凍融一兩次后，大部分蛋白就發(fā)生沉淀了，這是為什么？有方法避免嗎？ |
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9樓2013-03-05 13:50:14
lihuan0525
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【答案】應(yīng)助回帖
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jiapingshk: 金幣+10, ★有幫助 2013-03-04 16:24:41
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蛋白一般是不穩(wěn)定的，需要低溫保存，溫度越低，保存的時(shí)間久越長，而反復(fù)凍融會使蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)被破話。 甘油可以降低體系的極性，體系的極性降低了，有助于蛋白結(jié)構(gòu)穩(wěn)定；第二，甘油可以降低體系的凝固點(diǎn)，這樣利于蛋白在低溫下保存，如果不加甘油的話，蛋白反復(fù)凍融數(shù)次就會失活，甚至變性 同樣能夠起到保護(hù)作用的保護(hù)劑還有很多，吐溫20、一些氨基酸等等 |
6樓2013-03-04 14:35:31
2樓2013-03-02 20:52:49
jiapingshk
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3樓2013-03-03 09:45:25
崔士元
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4樓2013-03-03 14:06:18
jiapingshk
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5樓2013-03-04 11:37:48
zyx335588
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蛋白的保存有很多方法，依蛋白的性質(zhì)不同，其是否能夠凍存也不一定，這都需要試驗(yàn)來摸索，。某些蛋白有可能在凍存過程中發(fā)生了結(jié)構(gòu)的變化，產(chǎn)生你說的沉淀現(xiàn)象，建議你加一些甘油試試，如果還不行則建議你換用其他保存方式。各種方法保存后后的蛋白活性如何這也需要與新鮮的蛋白樣品做活性對照試驗(yàn)。 另外，除非你確定你的蛋白需要翻譯后修飾等才有活性，否則不能給籠統(tǒng)的說元和表達(dá)的蛋白都沒有活性�，F(xiàn)在的好多試驗(yàn)用蛋白樣品都是通過原核表達(dá)獲得的，包擴(kuò)一些生物醫(yī)藥產(chǎn)品。 |
7樓2013-03-05 09:25:52
gaojuan1985
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8樓2013-03-05 09:30:37
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10樓2013-03-05 22:10:33
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