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ann花開(kāi)花落銅蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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[求助]
PCR
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| 為何PCR產(chǎn)物的3‘末端會(huì)是A? |
新蟲(chóng) (初入文壇)
榮譽(yù)版主 (著名寫(xiě)手)
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專家經(jīng)驗(yàn): +24 |
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這是Taq DNA聚合酶的一種特性,因?yàn)門(mén)aq酶缺乏3’-》5‘的外切核酸酶活性,但不只是僅在PCR產(chǎn)物末端的3‘ 加A,Taq酶的特性是在dATP, dGTP, dCTP, dTTP多種堿基都存在的情況下,優(yōu)先將A加到3’的末端。假如反應(yīng)體系里面只有dTTP而沒(méi)有其他三種堿基,Taq酶也會(huì)將T加到3‘末端,有些T載體就是這么制備的。 高保真酶比如Pfu等擴(kuò)增的PCR片段都是平末端的,因?yàn)樗麄兌?’-->5‘的外切酶活力 |

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