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ann花開(kāi)花落銅蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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PCR
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| 為何PCR產(chǎn)物的3‘末端會(huì)是A？ |
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supingan
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2樓2013-03-05 17:13:09
gyesang
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
ann花開(kāi)花落: 金幣+5, ★★★很有幫助 2013-03-06 12:35:06
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ann花開(kāi)花落: 金幣+5, ★★★很有幫助 2013-03-06 12:35:06
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這是Taq DNA聚合酶的一種特性，因?yàn)門(mén)aq酶缺乏3’-》5‘的外切核酸酶活性，但不只是僅在PCR產(chǎn)物末端的3‘ 加A，Taq酶的特性是在dATP, dGTP, dCTP, dTTP多種堿基都存在的情況下，優(yōu)先將A加到3’的末端。假如反應(yīng)體系里面只有dTTP而沒(méi)有其他三種堿基，Taq酶也會(huì)將T加到3‘末端，有些T載體就是這么制備的。 高保真酶比如Pfu等擴(kuò)增的PCR片段都是平末端的，因?yàn)樗麄兌?’-->5‘的外切酶活力 |
3樓2013-03-05 19:08:06
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