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[求助]
實時熒光定量 處理不同時間取樣 想獲取目的基因在脅迫條件下的表達變化
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材料：4攝氏度處理條件下，分別在0,0.5,1,2,3,4,5等時間后取材，提取RNA，反轉錄cDNA，并以此為模板進行實時熒光定量。 目的：得知目的基因在冷脅迫條件下表達量的變化（相對定量）。 求助： 1、相對定量是否需要做標準曲線？標曲制作時，是不是內參一個反應，目的基因一個反應，不能同時做的么？ 2、以上各個時間段時取材是否應該放在同一個反應板上、同時進行？ 3、如果2是正確的話，那么擴增內參基因的樣品選擇哪個呢？理論上應該時一個處理時間段的樣品的內參、目的基因一起反應，這樣內參才具有參考的價值吧~ 我糊涂了~請大神指導！謝謝~ [ Last edited by 桃之夭夭pFly on 2013-3-6 at 15:30 ] |
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