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dearlanli新蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
關(guān)于熒光物質(zhì)激發(fā)波長(zhǎng)的問(wèn)題
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我在做細(xì)胞內(nèi)活性氧的測(cè)定,用的是2 ,7 -dichlorodihydrofluorescein diacetate (H2DCFDA)做染色劑,按照文獻(xiàn)的步驟對(duì)細(xì)胞進(jìn)行處理后用熒光分光光度計(jì)測(cè)量.我看的文獻(xiàn)用的是蔡司的熒光顯微鏡,其發(fā)射波長(zhǎng)是520,激發(fā)是485,其他文獻(xiàn)也差不多都是這個(gè)值,可是我用我們實(shí)驗(yàn)室的熒光分光光度計(jì)掃出來(lái)的激發(fā)是260,發(fā)射是520. 我已經(jīng)重復(fù)過(guò)實(shí)驗(yàn)了,而且樣品處理應(yīng)該是不會(huì)有問(wèn)題的,我每次自己掃出來(lái)的都一樣,那為什么會(huì)差這么多呢?這是不是說(shuō)明我的前處理一定有問(wèn)題,還是存在這樣的現(xiàn)象? |
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dearlanli
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5樓2013-03-11 13:52:24
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