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huanheihuan新蟲 (初入文壇)
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基因敲除中SOE-PCR引物的設(shè)計(jì)及載體的構(gòu)建
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| 最近想做單增李斯特菌中某一個(gè)基因的敲除,在構(gòu)建載體時(shí)想把目的基因的上游,下游連在載體上,并在上下游基因之間連一個(gè)抗生素抗性基因,以便篩選,SOE-PCR的引物怎么設(shè)計(jì)呀?還有這3個(gè)片段怎么連在一起啊,謝謝啦,我是新手啊,多謝了 |
新蟲 (初入文壇)
| 分別p出三段再連接,可通過(guò)添加酶切位點(diǎn)將3段連接也可作重疊PCR,抗性基因擴(kuò)增可先查找基因序列,再用primer5.0設(shè)計(jì)引物 |
新蟲 (初入文壇)
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