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陳朵朵銀蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
畢赤酵母上清中脂肪酶的定量檢測(cè)方法求助
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各位大俠, 我在誘導(dǎo)表達(dá)完克隆至畢赤酵母工程菌中的脂肪酶后,怎樣去定量檢測(cè)呢? 我查了聚乙烯醇橄欖油乳化法, 最后是通過(guò)判斷溶液呈粉紅色時(shí)結(jié)束NaOH滴定。但是問(wèn)題是如果我想直接檢測(cè)上清培養(yǎng)液中脂肪酶活性的話(huà),培養(yǎng)基本來(lái)就呈黃色,對(duì)滴定終點(diǎn)的判斷肯定會(huì)有影響。如果我先做硫酸銨沉淀再檢測(cè)脂肪酶酶活,挺麻煩的。各位大寫(xiě)有何高見(jiàn)。 另外有個(gè)問(wèn)題請(qǐng)教,取50ml上清粗酶液做硫酸銨沉淀,最后加 50ml 緩沖液做酶活測(cè)定嗎? |
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