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畢赤酵母上清中脂肪酶的定量檢測方法求助
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各位大俠, 我在誘導表達完克隆至畢赤酵母工程菌中的脂肪酶后,怎樣去定量檢測呢? 我查了聚乙烯醇橄欖油乳化法, 最后是通過判斷溶液呈粉紅色時結束NaOH滴定。但是問題是如果我想直接檢測上清培養(yǎng)液中脂肪酶活性的話,培養(yǎng)基本來就呈黃色,對滴定終點的判斷肯定會有影響。如果我先做硫酸銨沉淀再檢測脂肪酶酶活,挺麻煩的。各位大寫有何高見。 另外有個問題請教,取50ml上清粗酶液做硫酸銨沉淀,最后加 50ml 緩沖液做酶活測定嗎? |
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