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monazhou001新蟲 (初入文壇)
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[求助]
求助!實(shí)時(shí)定量PCR所有CT值都是undetermined,熔解曲線可以做出來(lái)
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是不是cDNA濃度太高了呢?之前普通PCR其實(shí)用的濃度更高,大概一千多ng,20體系加了2微升可以出目標(biāo)條帶 做qPCR這回稀釋了六倍,200ng每微升,20體系加了1微升 做出來(lái)所有CT都是無(wú)法識(shí)別的,溶解曲線應(yīng)該沒有什么問(wèn)題看起來(lái)。。 可是也做了一下梯度五倍五倍的梯度,做了五個(gè),沒有一個(gè)出CT值的 |
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