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why0393金蟲 (正式寫手)
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[求助]
牛副流感3型IFA實(shí)驗(yàn)
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本人是做單抗的，現(xiàn)有分泌抗BPIV3單抗的雜交瘤細(xì)胞，抽取細(xì)胞培養(yǎng)上清做IFA鑒定，卻發(fā)現(xiàn)了不正常的問題。 本人使用雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)上清做一抗，購買的羊抗鼠FITC標(biāo)記單抗做二抗，按照正常的實(shí)驗(yàn)路徑，接毒兩天后固定，洗滌，加一抗，洗滌，加二抗，洗滌，觀察結(jié)果： 1、第一眼看來，樣品的熒光效果特別好，就連細(xì)胞脫落的部位都很明顯，陰性對(duì)照沒有出現(xiàn)這樣的熒光 2、第二眼看來，不對(duì)勁啊，怎么都是細(xì)胞邊界亮呢，細(xì)胞漿很少有熒光出現(xiàn)，莫非，全都是非特異性的？假陽性？也不對(duì)啊，稀釋的一抗呈階梯性的亮光減少啊！ 3、暈！有陰性有樣品沒有陽性！呵呵，本實(shí)驗(yàn)沒找到陽性參考試劑，下一步準(zhǔn)備自己制備一些抗性小鼠血清驗(yàn)證。 PS：這可不對(duì)啊，以前的IFA實(shí)驗(yàn)，別人的IFA實(shí)驗(yàn)全是這么來，到底怎么回事？？？ 求高手指教啊啊�。� 圖片發(fā)不上去，于是就選擇了文件附件形式，多多體諒！ |
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2013-03-22 19:58:39, 684.6 K
2013-03-22 20:02:33, 515.54 K
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3樓2013-03-28 20:15:55
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