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why0393金蟲 (正式寫手)
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[求助]
牛副流感3型IFA實(shí)驗(yàn)
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本人是做單抗的,現(xiàn)有分泌抗BPIV3單抗的雜交瘤細(xì)胞,抽取細(xì)胞培養(yǎng)上清做IFA鑒定,卻發(fā)現(xiàn)了不正常的問題。 本人使用雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)上清做一抗,購買的羊抗鼠FITC標(biāo)記單抗做二抗,按照正常的實(shí)驗(yàn)路徑,接毒兩天后固定,洗滌,加一抗,洗滌,加二抗,洗滌,觀察結(jié)果: 1、第一眼看來,樣品的熒光效果特別好,就連細(xì)胞脫落的部位都很明顯,陰性對照沒有出現(xiàn)這樣的熒光 2、第二眼看來,不對勁啊,怎么都是細(xì)胞邊界亮呢,細(xì)胞漿很少有熒光出現(xiàn),莫非,全都是非特異性的?假陽性?也不對啊,稀釋的一抗呈階梯性的亮光減少! 3、暈!有陰性有樣品沒有陽性!呵呵,本實(shí)驗(yàn)沒找到陽性參考試劑,下一步準(zhǔn)備自己制備一些抗性小鼠血清驗(yàn)證。 PS:這可不對啊,以前的IFA實(shí)驗(yàn),別人的IFA實(shí)驗(yàn)全是這么來,到底怎么回事??? 求高手指教啊啊! 圖片發(fā)不上去,于是就選擇了文件附件形式,多多體諒! |

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