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刀巴廣林鬼木蟲 (小有名氣)
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[求助]
有關脫氧核糖的羥自由基清除實驗的問題
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本人最近在做脫氧核糖羥自由基清除實驗,參考的文獻是Okezie I. A. Deoxyribose assay for detecting hydroxyl radicals.Methods in Enzymology, 1994, 233: 57-66. 根據上面的方法,本人按這樣的順序加入試劑:PBS+FeCl3/EDTA+脫氧核糖+樣品(以Trolox為陽性對照)+H2O2,最后加入VitC引發(fā)反應;后面用TBA和TCA顯色。 但是很奇怪的就是,幾乎每次做的結果都是顏色由淺至深,而合理的結果應該是由深至淺。 還有另外一個問題,這個實驗要求樣品要溶于水,但是不溶于水的樣品可以做么?我考察過甲醇、乙醇、DMSO、THF、DMF、丙酮和乙腈作為溶劑,發(fā)現它們都會使陽性對照組褪至無色甚至變成其他顏色,請問有人遇到這種情況并解決了么?我看很多文獻還有學位論文都報道揮發(fā)油做羥自由基清除實驗,都是用甲醇乙醇去溶解,但我覺得應該不可能吧? 真心求助,謝謝! |

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