 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 2 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 613 | 回復(fù): 1 | ||
熊孩子飛銀蟲 (初入文壇)
|
[求助]
青枯菌（或者相似菌）電轉(zhuǎn)問題，急！還請(qǐng)大家?guī)蛶兔?
|
|
最近在做一株菌的電轉(zhuǎn)，是與青枯菌（Ralstonia）同屬的菌，想轉(zhuǎn)入GFP質(zhì)粒，進(jìn)行熒光檢測(cè)，可是做了很多次都不成功啊，還請(qǐng)大家了解的幫幫忙，或者做過相似的陰性菌也說幾句話吧~ 我的方法是： OD600=0.4-0.6（大概8-10h）的時(shí)候冰浴30min，6000rpm離心6min，用無菌水洗3-4次，最后用1mL無菌水重懸。 每200 uL感受態(tài)分裝到電轉(zhuǎn)杯中，加2-5 uL質(zhì)粒，電轉(zhuǎn)，1.5kV，2.0kV，2.5kV，3.0kV都試過，之后加LB 80rpm過夜復(fù)蘇，涂布。 不管怎么樣，還是希望大家交流一下，如果真的有幫助的，我會(huì)加金幣。才來這里，不知道一般是給多少金幣的。謝謝大家！ |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：實(shí)驗(yàn)器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：和實(shí)驗(yàn)材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤(rùn)色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有216人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測(cè)：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測(cè)：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測(cè)重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- 青枯菌半選擇性培養(yǎng)基---TTC培養(yǎng)基，你信幾分？
已經(jīng)有13人回復(fù)
- 【求助/交流】枯草芽孢桿菌電轉(zhuǎn)化
已經(jīng)有17人回復(fù)
跳跳虎201314
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 2.3
- 帖子: 4
- 在線: 2.5小時(shí)
- 蟲號(hào): 2423135
- 注冊(cè): 2013-04-17
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
myprayer: 金幣+1, 贈(zèng)人玫瑰手有余香，鼓勵(lì)應(yīng)助，分子生物版塊期待你的更多精彩。 2013-04-18 08:23:18
熊孩子飛: 金幣+10, ★★★很有幫助, 十分感謝 2013-04-19 04:17:35
myprayer: 金幣+1, 贈(zèng)人玫瑰手有余香，鼓勵(lì)應(yīng)助，分子生物版塊期待你的更多精彩。 2013-04-18 08:23:18
熊孩子飛: 金幣+10, ★★★很有幫助, 十分感謝 2013-04-19 04:17:35
| 一般去10mL培養(yǎng)液，10mL的預(yù)冷無菌水洗兩遍，最后一遍用10%甘油洗，再用200uL10%甘油,100uL分裝，你試試？復(fù)蘇一般用SOC，怕離子濃度高，就稀釋5倍，復(fù)蘇的話3h就夠了，怎么要過夜呀？還有就是想問你你GFP質(zhì)粒帶那個(gè)抗生素標(biāo)記？有氨芐或者壯觀霉素的嗎？看到后速回，想交流一下！lebora@sina.com |
2樓2013-04-17 22:00:32
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 熊孩子飛 的主題更新
| 2 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 材料專碩306英一數(shù)二 +8 | z1z2z3879 2026-03-16 | 10/500 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 301求調(diào)劑 +6 | yy要上岸呀 2026-03-17 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 277調(diào)劑 +5 | 自由煎餅果子 2026-03-16 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 有沒有道鐵/土木的想調(diào)劑南林，給自己招師弟中～ +3 | TqlXswl 2026-03-16 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 材料工程專碩274一志愿211求調(diào)劑 +6 | 薛云鵬 2026-03-15 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 材料與化工304求B區(qū)調(diào)劑 +7 | 邱gl 2026-03-11 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 一志愿985，本科211，0817化學(xué)工程與技術(shù)319求調(diào)劑 +5 | Liwangman 2026-03-15 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 0703一志愿211 285分求調(diào)劑 +5 | ly3471z 2026-03-13 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 070303 總分349求調(diào)劑 +3 | LJY9966 2026-03-15 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 326求調(diào)劑 +3 | mlpqaz03 2026-03-15 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 070305求調(diào)劑 +3 | mlpqaz03 2026-03-14 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 080500，材料學(xué)碩302分求調(diào)劑學(xué)校 +4 | 初識(shí)可樂 2026-03-14 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 255求調(diào)劑 +3 | 李嘉慧， 2026-03-12 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +6 | Mochaaaa 2026-03-12 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 求材料調(diào)劑 085600英一數(shù)二總分302 前三科235 精通機(jī)器學(xué)習(xí) 一志愿哈工大 +4 | 林yaxin 2026-03-12 | 4/200 |
|
|
|
[考研] （081700）化學(xué)工程與技術(shù)-298分求調(diào)劑 +12 | 11啦啦啦 2026-03-11 | 35/1750 |
|
|
|
[考研] 311求調(diào)劑 +3 | 冬十三 2026-03-13 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 085600材料與化工 309分請(qǐng)求調(diào)劑 +7 | dtdxzxx 2026-03-12 | 8/400 |
|
|
|
[論文投稿]
投稿問題
 5+4
|
星光燦爛xt 2026-03-12 | 6/300 |
|
|
|
[考博] 2026年博士申請(qǐng) +3 | QwQwQW10 2026-03-11 | 3/150 |
|