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gya89銅蟲 (小有名氣)
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[求助]
微生物拮抗物質(zhì)提取
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| 想提取一株菌的拮抗物質(zhì),還不知道是哪種拮抗物質(zhì),在平板上做拮抗圈,上清是用水溶還是拿甲醇 、乙醇、乙酸乙酯類的有機(jī)溶劑提?求指教 |

銅蟲 (小有名氣)
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上清來冷凍干燥?這得要好久的功夫吧。為什么要用有機(jī)溶劑來溶解做拮抗圈呢?你有實(shí)驗(yàn)過你的有機(jī)溶劑會不會自己形成拮抗圈呢?如果能冷凍干燥下來的話,最好還是用水來溶解,相當(dāng)于濃縮了,然后做拮抗實(shí)驗(yàn)。甲醇和乙醇是與水互溶的,拿這個是提取不出來拮抗物質(zhì)的,較好的結(jié)果是你用這兩個醇能把拮抗物質(zhì)沉淀下來,然后離心去上清,收集沉淀,再拿水溶,然后做抑菌實(shí)驗(yàn)。令一方面,這兩個醇幾乎對所有細(xì)菌有拮抗作用,一定要注意他倆的實(shí)驗(yàn)方法。如果LZ現(xiàn)在只是想做抑菌實(shí)驗(yàn),最好還是旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)它的發(fā)酵液,達(dá)到濃縮目的;如果想純化這個拮抗物質(zhì),再用乙酸乙酯、甲醇乙醇沉淀或者酸堿沉淀等方法來做。 |



銅蟲 (小有名氣)
| LZ的是什么菌?這種菌你查過文獻(xiàn)都分泌那些抗菌物質(zhì)嗎?上清用甲醇 、乙醇溶的話,相當(dāng)于把抗菌物質(zhì)給稀釋了,這兩種溶劑還有一種狀況,就是把活性物質(zhì)沉淀下來了,總的效果來說不太好,要是只做抑菌實(shí)驗(yàn)的話,勸LZ把發(fā)酵液離心的上清濃縮,不錯的辦法,就是時間可能要久點(diǎn),畢竟旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)的是水,比較慢,或者用乙酸乙酯這些中極性的有機(jī)溶液抽提,如果能抽提出來,也是一種不錯的渠道,望樓主接收,如有問題可以接著再問。 |

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