 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 3/1 | 返回列表 |
| 查看: 3648 | 回復: 27 | |||
| 當前只顯示滿足指定條件的回帖，點擊這里查看本話題的所有回帖 | |||
許老板金蟲 (小有名氣)
|
[交流]
膠原蛋白的提取，我綜合的一個方案，麻煩大家看看，我有些疑問額。 已有6人參與
|
||
|
膠原蛋白的提取 實驗原料：豬皮，氯仿，乙醇，乙酸，0.05mol/L Tris-HCl緩沖液，NaCl，NaOH，胃蛋白酶，蒸餾水。 實驗器材：攪拌機，低溫離心機，控溫磁力攪拌器，電子天平，透析設備，PH試紙，燒杯，玻璃棒，小刀，研缽。 實驗需配藥品：A:氯仿/乙醇（2:1）約需400ml， B:0.5mol/L乙酸約3000ml， C:6mol/L NaOH溶液約40ml, D:質(zhì)量分數(shù)0.1％、0.01％的乙酸（透析用）， E:含4.5mol/LNaCl的0.05mol/LTris-HCl緩沖液約需200ml。 實驗步驟： 1,豬皮的前處理： （1）稱取豬皮50g，用氯仿/乙醇（2:1，A）溶液對其進行脫脂后切除皮下脂肪，去毛并細切； （2）將組織小塊用乙醇和蒸餾水洗滌多次； （3）將洗滌后的組織放入攪拌機中攪拌成糊狀，用含4.5mol/L NaCl的0.05mol/L Tris-HCl緩沖液（pH 7.5，E）充分洗滌（2h）以去除脂質(zhì)及血清等成分，低溫離心（8000r/min，30min，4℃）取沉淀。 2,提取膠原蛋白： （1）進行前處理后，在沉淀中加入500ml含胃蛋白酶250mg的0.5mol/L冰醋酸（B），攪拌并維持在4℃，提取48h； （2） 高速冷凍離心機離心（4000r/min）吸取上清液。在上清液中加入NaCl至4.4mol/L（NaCl2.2mol）攪拌過夜； （3）低溫離心，將沉淀溶于0.5mol/L冰醋酸中，再逐級用2.4mol/L（NaCl1.2mol，以500ml冰醋酸計），1.7mol/L（NaCl0.85mol）及1.0mol/L（NaCl0.5mol）的NaCl反復鹽析、酸溶。最后得到的上清液即為膠原粗提液。 3,膠原蛋白提純: （1）在粗提膠原蛋白溶液緩慢加入6 mol/L NaOH溶液（C）調(diào)節(jié)pH值到7，冷凍離心除掉沉淀物，在剩余的溶液中加入氯化鈉固體研細粉末，緩慢攪拌，4 ℃靜置過夜保存； （2）離心取沉淀，用稀醋酸再次溶解，將溶解液裝入透析袋中，用質(zhì)量分數(shù)分別為0.1%、0.01%的乙酸溶液（D）透析1 d，再用蒸餾水透析3d，每天換透析液兩次，最后得到的是純度較高的膠原蛋白水溶液； （3）將純化的膠原蛋白水溶液采用低溫冷凍干燥法制備成純膠原蛋白樣品，備用。 |
回復此樓» 猜你喜歡
一志愿中山大學生物學，295分，求A區(qū)調(diào)劑
已經(jīng)有2人回復
-
求助化合物CD數(shù)據(jù)的處理
已經(jīng)有0人回復
-
生物力學與組織工程學論文潤色/翻譯怎么收費?
已經(jīng)有69人回復
-
廣州醫(yī)科大學生物醫(yī)學工程學院 生物醫(yī)學工程工學-083100 招生
已經(jīng)有5人回復
-
一志愿湖南大學 生物學332分 有國獎+省級
已經(jīng)有1人回復
-
美國南加大(USC)藥學院Prof. Yong (Tiger) Zhang課題組誠聘博士后
已經(jīng)有0人回復
-
湖北工業(yè)大學食品科學與工程系課題組招收2026級食品/生物醫(yī)藥碩士生（含調(diào)劑）
已經(jīng)有0人回復
-
2026年博士生自我推薦
已經(jīng)有1人回復
-
一志愿211生物學（0710）總分325求調(diào)劑
已經(jīng)有2人回復
-
求調(diào)劑推薦
已經(jīng)有4人回復
fool_proof
鐵桿木蟲 (正式寫手)
- 應助: 97 (初中生)
- 貴賓: 0.298
- 金幣: 7081.6
- 散金: 533
- 紅花: 3
- 帖子: 870
- 在線: 319小時
- 蟲號: 1066876
- 注冊: 2010-07-30
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物醫(yī)用高分子材料
23樓2013-05-20 20:27:17
許老板
金蟲 (小有名氣)
- 應助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 722.8
- 帖子: 78
- 在線: 70.6小時
- 蟲號: 2069667
- 注冊: 2012-10-18
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物醫(yī)用高分子材料
3樓2013-04-16 23:10:59
4樓2013-04-17 05:36:53
fool_proof
鐵桿木蟲 (正式寫手)
- 應助: 97 (初中生)
- 貴賓: 0.298
- 金幣: 7081.6
- 散金: 533
- 紅花: 3
- 帖子: 870
- 在線: 319小時
- 蟲號: 1066876
- 注冊: 2010-07-30
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物醫(yī)用高分子材料
5樓2013-04-17 12:58:43
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 一志愿武理材料工程348求調(diào)劑 +6 | ￣^￣゜汗 2026-03-19 | 9/450 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 工科0856求調(diào)劑 +5 | 沐析汀汀 2026-03-21 | 5/250 |
|
|
|
[論文投稿] 急發(fā)核心期刊論文 +3 | 賢達問津 2026-03-23 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 328求調(diào)劑 +4 | LHHL66 2026-03-23 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 北科281學碩材料求調(diào)劑 +8 | tcxiaoxx 2026-03-20 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 070300，一志愿北航320求調(diào)劑 +3 | Jerry0216 2026-03-22 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 318求調(diào)劑 +4 | plum李子 2026-03-21 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +5 | Zhangbod 2026-03-21 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 廣西大學材料導師推薦 +3 | 夏夏夏小正 2026-03-17 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 材料學碩333求調(diào)劑 +3 | 北道巷 2026-03-18 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 求助 +5 | 夢里的無言 2026-03-21 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 311求調(diào)劑 +3 | 勇敢的小吳 2026-03-20 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 22 350 本科985求調(diào)劑，求老登收留 +3 | 李軼男003 2026-03-20 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 332求調(diào)劑 +3 | 鳳凰院丁真 2026-03-20 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 265求調(diào)劑 +3 | Jack?k?y 2026-03-17 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 華東師范大學-071000生物學-293分-求調(diào)劑 +3 | 研究生何瑤明 2026-03-18 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 317求調(diào)劑 +5 | 申子申申 2026-03-19 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 086500 325 求調(diào)劑 +3 | 領帶小熊 2026-03-19 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 招收調(diào)劑碩士 +4 | lidianxing 2026-03-19 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 085410人工智能專碩317求調(diào)劑（0854都可以） +4 | xbxudjdn 2026-03-18 | 4/200 |
|