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peifeinini銅蟲 (正式寫手)
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[求助]
肝實質(zhì)細胞提取中DNase的作用
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新手上路，盼過來人指點一二。 打算提取肝實質(zhì)細胞，paper中有提到切除后的肝臟泡在有膠原酶 IV和DNase的灌注液中弄碎，37度下?lián)u10 min，再過濾，離心…… 想問的是，在這里DNase的具體作用是什么？不用它的話影響大不大？因為現(xiàn)在暫時沒有這個東西，而我也看到很多paper好像也沒有用它，所以想干脆就不加了。大家有何意見和建議嗎？非常感謝。 |
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3樓2013-04-19 11:33:35
myprayer
專家顧問 (著名寫手)
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【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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DNase 脫氧核糖核酸酶（亦稱DNase） 由牛胰制備的脫氧核糖核酸;脫氧核糖核酸酶;DNA酶;去氧核糖核酸酶;胰道酶;胰克氧核糖核酸酶;除氧細胞核酸酶（牛胰）;去氧細胞核酸酶； 物化性質(zhì)：單位定義：37℃，50μl緩沖液（40mM Tris-HCl （pH 7.9 at 25℃）、10mM NaCl、 6mM MgCl2、10mM CaCl2）中，每十分鐘完全降解1μg DNA的酶量為1單位。 類白色凍干粉，易溶于水，微溶于30%乙醇和丙酮，最適pH值7.8。水溶液中加入5mmol/L Ca2+或二異丙基氟磷酸（DFP）可增加其穩(wěn)定性。抑制劑有EDTA和十二烷基磺酸鈉；激活劑為二價金屬離子，Mg2+與Ca2+合用可得到最佳效果。1%水溶液在280nm處吸收系數(shù)為11.1。限制消化的平均鏈長為四核苷酸，酶反應(yīng)：脫氧核糖核酸═二核苷酸-5'-磷酸+寡聚核苷酸-5'-磷酸。脫氧核糖核酸酶（DNase） 主要用途：用于降解RNA中的DNA，純化RNA；研究DNA與蛋白質(zhì)的相互作用。  用于生化研究，臨床上常用作祛痰藥，也可局部用于膿腫、血腫以及鞘內(nèi)注射治療腦膜炎。 儲存條件：−20℃GOY0414 LPM瓊脂 單增李氏菌的選擇性分離 250g Amresco GOY0415 Half Fraser培養(yǎng)基 李氏菌的增菌培養(yǎng) 250g Amresco GOY0416 SIM動力培養(yǎng)基/SIM培養(yǎng)基 李氏菌動力觀察，H抗原位相變異試驗；硫化氫、動力、吲哚試驗 250g Amresco GOY0417 李氏菌選擇性培養(yǎng)基基礎(chǔ)/改良McBride瓊脂培養(yǎng)基/MMA 單增李氏菌選擇性分離 250g Amresco 芐酯對甲苯磺酸鹽N-乙酰-L-酪氨酸L-酪氨酸叔丁酯L-酪氨酸芐酯對甲苯磺酸鹽Thr-OtBu·HClL-蘇氨酸芐酯半草酸鹽5-氨基酮戊酸甲酯鹽酸鹽L-絲氨酸甲酯鹽酸鹽D-苯芴甲氧羰基-N-epsilon-叔丁氧羰基-L-賴氨酸Fmoc-L-亮氨酸Fmoc-L-異亮氨酸N-Fmoc-N'-三苯甲基-L-組氨賴氨酸N-alpha-酰門冬氨酸-4-叔丁基酯L-天冬氨酸-4-芐酯L-精氨酸乙酯二鹽酸鹽β-丙氨酸叔丁酯鹽酸鹽D-丙氨酸叔丁酯鹽酸鹽L-丙氨酸叔丁酯鹽酸鹽L-丙氨酸乙酯鹽酸鹽D-苯丙氨酸芐酯對甲苯磺酸鹽L-丙氨酸芐酯對GOY0252 N-乙酰-DL-蛋氨酸/N-乙酰-DL-甲硫氨酸/N-乙�；�-DL-甲硫氨酸/N-Acetyl-DL-Methionine BR，脫氧核糖核酸酶（DNase） RQ1 RNase-Free DNase from Bovine pancreas.99丁基-L-絲氨酸Fmoc-O-芐基-L-絲氨酸N-芴甲氧羰基-D-絲氨酸Fmoc-L-絲氨酸FMOC-D-苯甘氨酸Fmoc-L-苯基甘氨酸Fmoc-L-羥脯氨酸Fmoc-D-脯氨酸Fm GOY0418 EB增菌肉湯培養(yǎng)基基礎(chǔ)/EB增菌液 單核細胞增生李氏特菌增菌 250g Amresco GOY0419 Fraser培養(yǎng)基 李氏菌的增菌培養(yǎng) 250g Amresco GOY0420 UVM培養(yǎng)基 李氏菌的增菌培養(yǎng) 250g Amresco GOY0421 LM-137瓊脂 膜濾法單增李氏菌的選擇性分離 250g Amresco GOY0422 改良緩沖蛋白胨水/MBP 李氏菌的增殖 250g Amresco GOY0423 枸櫞酸鹽培養(yǎng)基 大腸桿菌和產(chǎn)氣桿菌的鑒別 250g Amresco GOY0424 Christensen尿素瓊脂 腸桿菌、需氧放線菌、鏈球菌及非發(fā)酵培養(yǎng)革蘭氏陰性桿菌等尿素酶的活性鑒定 250g Amresco GOY0425 尿素酶瓊脂基礎(chǔ)/尿素瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ) 細菌脲酶檢測，腸桿菌鑒別 250g Amresco |
2樓2013-04-19 08:39:45
peifeinini
銅蟲 (正式寫手)
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- 專業(yè): 色譜分析
4樓2013-04-20 13:32:54
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噢，我們實驗室提的也沒有用DNase。取肝細胞的關(guān)鍵主要是膠原酶在體內(nèi)作用的是否充分，如果充分的話取下來之后非常好弄碎。個人感覺，弄碎時應(yīng)該無所謂膠原酶和DNase。 |
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peifeinini5樓2013-04-20 23:02:03
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