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請(qǐng)問什么植物干擾載體效果比較好
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 請(qǐng)問大家哪個(gè)植物干擾載體效果比較好..之前想用表達(dá)載體構(gòu)建一個(gè)..但是那個(gè)載體死活切不開.. 因此想換一個(gè)干擾載體..請(qǐng)各位大神推薦一下.. 順便請(qǐng)問我那個(gè)pBI121載體切不開是什么問題呢..原來用TAKARA的酶SacI和BamHI.. 后來換NEB的HiFi酶..按說明書上的體系..37度也切不開..  。。求指教。。 先謝謝大家了。。 |
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michaelwuqingyu
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
cecilyn: 金幣+10, ★★★很有幫助 2013-04-20 21:04:46
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cecilyn: 金幣+10, ★★★很有幫助 2013-04-20 21:04:46
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這兩種酶對(duì)甲基化都不敏感，一般應(yīng)該不會(huì)有問題。 你確定你的載體正確么？ 最好用35S 啟動(dòng)子上的引物測(cè)一下序。有很多從別人拿過來的載體和map對(duì)不上。 另外你質(zhì)粒提取應(yīng)該沒有問題吧，如果有酒精污染之類的會(huì)影響酶切。 RNAi干擾載體用Gateway的方法構(gòu)建容易一些，現(xiàn)在可能很少有人用酶切連接的老方法構(gòu)建RNAi載體了。不知道你要往什么植物里轉(zhuǎn)？如果水稻 可以用pANDA 系列 vector。如果雙子葉植物用pK7GWIWG不錯(cuò)。 |
2樓2013-04-20 10:43:19
3樓2013-04-20 21:10:30
michaelwuqingyu
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4樓2013-04-21 02:38:07
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