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請問什么植物干擾載體效果比較好
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 請問大家哪個植物干擾載體效果比較好..之前想用表達載體構建一個..但是那個載體死活切不開.. 因此想換一個干擾載體..請各位大神推薦一下.. 順便請問我那個pBI121載體切不開是什么問題呢..原來用TAKARA的酶SacI和BamHI.. 后來換NEB的HiFi酶..按說明書上的體系..37度也切不開..  。。求指教。。 先謝謝大家了。。 |
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michaelwuqingyu
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【答案】應助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應助指數(shù) +1
cecilyn: 金幣+10, ★★★很有幫助 2013-04-20 21:04:46
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cecilyn: 金幣+10, ★★★很有幫助 2013-04-20 21:04:46
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這兩種酶對甲基化都不敏感，一般應該不會有問題。 你確定你的載體正確么？ 最好用35S 啟動子上的引物測一下序。有很多從別人拿過來的載體和map對不上。 另外你質粒提取應該沒有問題吧，如果有酒精污染之類的會影響酶切。 RNAi干擾載體用Gateway的方法構建容易一些，現(xiàn)在可能很少有人用酶切連接的老方法構建RNAi載體了。不知道你要往什么植物里轉？如果水稻 可以用pANDA 系列 vector。如果雙子葉植物用pK7GWIWG不錯。 |
2樓2013-04-20 10:43:19
3樓2013-04-20 21:10:30
michaelwuqingyu
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4樓2013-04-21 02:38:07
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