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709397457銀蟲 (小有名氣)
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[求助]
如何做細(xì)菌生長(zhǎng)曲線
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| 請(qǐng)問(wèn)大家如何做OD值與細(xì)菌數(shù)之間的生長(zhǎng)曲線？ |
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木蟲 (著名寫手)
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
zhangxingc: 金幣+2, 鼓勵(lì)積極應(yīng)助，歡迎常到微生物版 2013-04-26 08:49:57
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
zhangxingc: 金幣+2, 鼓勵(lì)積極應(yīng)助，歡迎常到微生物版 2013-04-26 08:49:57
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1.活化菌種：-20度或者-80凍存的菌最好活化2次，4度的活化1次就夠了，長(zhǎng)到對(duì)數(shù)期時(shí)開始實(shí)驗(yàn) 2.調(diào)菌濃：用酶標(biāo)儀或者分光光度計(jì)測(cè)OD，把待測(cè)的幾株菌濃度調(diào)一致。（要是只有一株那就沒(méi)必要了，不過(guò)測(cè)個(gè)OD也沒(méi)壞處，自己對(duì)菌濃有個(gè)了解也方便后面的實(shí)驗(yàn)） 3.把調(diào)好的菌液接種到新鮮培養(yǎng)基中，混勻，分裝若干管（看你要測(cè)多少個(gè)時(shí)間點(diǎn)就分多少管，最好再留出兩三管備用的，如果不放心也可以每個(gè)時(shí)間點(diǎn)留2管），恒溫箱培養(yǎng)（需氧還是厭氧就看是什么菌了）。記得留一些空白培養(yǎng)基，測(cè)OD時(shí)做空白對(duì)照。 4.每個(gè)時(shí)間點(diǎn)取出一管混勻（一般是間隔2h，看你自己的需要吧），測(cè)OD，如果需要也可以測(cè)pH。 具體每個(gè)環(huán)節(jié)菌液調(diào)到什么濃度，加多少，就得看具體是什么菌了，沒(méi)法一概而論。 測(cè)生長(zhǎng)曲線還是挺辛苦的。。。。有時(shí)還要通宵-。- |
2樓2013-04-25 23:40:12
【答案】應(yīng)助回帖
★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
709397457: 金幣+1, ★有幫助 2013-04-27 21:53:04
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
709397457: 金幣+1, ★有幫助 2013-04-27 21:53:04
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用試管做，比如你想2h取一次樣，每次取樣做3個(gè)重復(fù)，連續(xù)跟蹤36h，那么可以這樣設(shè)計(jì)： ① 取54根試管，每一個(gè)試管都接相同的菌懸液（一級(jí)種子液）； ② 搖床搖，每2h取走3根，其他的接著搖，取走的就不要放回去了。 其他的什么一級(jí)種子液什么的，我想你應(yīng)該懂。這個(gè)思路主要是避免染菌，操作還方便，快速。。培養(yǎng)時(shí)，請(qǐng)務(wù)必傾斜，70°左右就行了。 |
3樓2013-04-26 17:42:06
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