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lamborghini_銅蟲 (正式寫手)
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[交流]
有沒有用過臺(tái)盼藍(lán)覺得很不靠譜的同學(xué)�。� 已有6人參與
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| RT，在實(shí)驗(yàn)中用過很多次臺(tái)盼藍(lán)了，但是一直覺得這玩意兒不靠譜，因?yàn)樵陲@微鏡下我根本就看不到染成紫色的細(xì)胞... 我看到的所有細(xì)胞都是透明的，偶爾會(huì)看到顏色不透亮細(xì)胞內(nèi)有小顆粒的東西，但是細(xì)胞沒有染成藍(lán)色，也不知道算不算死細(xì)胞。 總之用了一個(gè)多月后的感覺就是臺(tái)盼藍(lán)不靠譜，無(wú)法計(jì)算死活細(xì)胞。 不知道朋友們都是怎么在用臺(tái)盼藍(lán)的？會(huì)不會(huì)有和我一樣的感覺？ |
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silicare: 金幣+3, BioEPI+1, 應(yīng)助指數(shù)+1, 謝謝參與 2013-08-21 17:50:22
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silicare: 金幣+3, BioEPI+1, 應(yīng)助指數(shù)+1, 謝謝參與 2013-08-21 17:50:22
| 臺(tái)盼藍(lán)靠譜是不用質(zhì)疑的。臺(tái)盼藍(lán)和細(xì)胞液1：1混合，背景應(yīng)該是藍(lán)的，不然就是臺(tái)盼藍(lán)太稀了，死細(xì)胞在短時(shí)間都能染上的。計(jì)數(shù)板上面一般都會(huì)標(biāo)注格子大小，長(zhǎng)寬1mm，高度0.1mm（四周的16個(gè)小方格組成的大格子），數(shù)16格取平均數(shù)，乘以10000就行。 |
6樓2013-08-14 08:49:03
edudiant
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2樓2013-04-29 08:11:37
xutao
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3樓2013-04-29 10:55:43
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我最近也在用臺(tái)盼藍(lán)測(cè)細(xì)胞活力，也是感覺這個(gè)實(shí)驗(yàn)做到比較糾結(jié)：很多時(shí)候都染不上，有時(shí)候染上了，卻發(fā)現(xiàn)被染的細(xì)胞在技術(shù)板上分布不均勻。以下是我的實(shí)驗(yàn)步驟：消化細(xì)胞，用PBS洗細(xì)胞一次，然后分別取20ul的細(xì)胞懸液與0.2%的臺(tái)盼藍(lán)混合，4min左右滴到血細(xì)胞計(jì)數(shù)板上在顯微鏡下觀察。以下是我做的細(xì)胞圖片： 很多情況下我做的實(shí)驗(yàn)結(jié)果都是如圖528的圖片，在此請(qǐng)高手指教： 為什么會(huì)染不上呢？我的實(shí)驗(yàn)步驟有錯(cuò)誤的地方嗎？ 為什么有些同學(xué)的照片的背景是藍(lán)色的？是怎么調(diào)的呢？ 還有血細(xì)胞計(jì)數(shù)板的中間的凹槽到底是多少體積的呢？ IMG_3528.JPG IMG_3527.JPG |
4樓2013-08-13 10:12:58
小周
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5樓2013-08-13 20:37:22
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首先非常感謝你有價(jià)值的回答！關(guān)于計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，請(qǐng)恕我愚鈍，如果四周的大格的體積是0.1立方毫米的話，那在計(jì)數(shù)的時(shí)候，應(yīng)該是數(shù)四周大格細(xì)胞的數(shù)目，取平均，然后再乘以10000啊，為什么是16個(gè)小格呢？ 另外，關(guān)于臺(tái)盼藍(lán)溶液的濃度，我是直接配置0.4%（w/v）的臺(tái)盼藍(lán)，使用的時(shí)候，是和細(xì)胞懸液1：1顯色度，請(qǐng)問這個(gè)濃度是低了嗎？ 請(qǐng)不吝賜教，謝謝了  [ Last edited by superxhj on 2013-8-16 at 11:38 ] |
7樓2013-08-16 11:11:21
8樓2013-08-19 08:47:24
zhangbighui
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10樓2013-08-21 15:06:47
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