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sspc和dgge有什么區(qū)別？主要是測試目標(biāo)方面
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2樓2013-05-02 10:35:26
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3樓2013-05-03 07:54:18
4樓2013-05-03 08:45:21
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stormxuhao: 金幣+2, 積極應(yīng)助 2013-05-03 09:14:53
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DGGE 和SSCP 技術(shù)都是基于相同長度不同堿基序列的DNA 片段在電場中電泳遷移率不同而進(jìn)行分離, 但兩者形成電泳遷移率差異的原理不同。前者是雙鏈DNA 分子在含梯度變性劑的聚丙烯酰胺凝膠中變性, 從而發(fā)生空間構(gòu)型的變化;后者則是單鏈DNA 分子在非變性的聚丙烯酰胺凝膠中, 通過內(nèi)部堿基配對形成不同的空間構(gòu)象。DGGE 由于 GC 夾的特殊作用, 需要使用較長的PCR 引物, 加之PCR 產(chǎn)物中的異源雙鏈DNA 分子, 在DGGE 圖譜中可能會產(chǎn)生一些“假”條帶; 而SSCP 則不受這兩種因素的影響. 前者所需要的儀器比較簡單也不貴,后者需要專門的電泳儀.效果上差不多,操作時,前者需要聚然降溫,引物要磷酸化;后者引物要設(shè)計GC夾子.反正都比較麻煩,DGGE是一種健全地方法，一旦優(yōu)選一個產(chǎn)物，他將很有效。結(jié)果也很容易檢測出來，因為只要放在紫外燈下一看就能立刻看到突變。清晰的結(jié)果是DGGE的一個巨大的優(yōu)點。另外一個優(yōu)點是它不需要放射性標(biāo)記。SSCP需要放射性PCR或者銀染，并且結(jié)果不夠清晰。另一方面，SSCP比DGGE需要的時間少，并且不需要昂貴的材料。這就是為什么大量的樣本用這種方法的原因。例如，篩選少量的樣本要求用SSCP。DGGE適合于少選大量的長周期的樣本 |
5樓2013-05-03 08:53:51
6樓2013-05-03 09:24:14
7樓2013-05-03 09:26:59
8樓2013-05-03 09:33:27
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