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北京石油化工學院2026年研究生招生接收調(diào)劑公告
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chenhw06

金蟲 (正式寫手)


[交流] 有精通HPLC的蟲蟲嗎

有沒有對高效液相比較精通的親啊,接觸時間不長,好多都不了解,有比較精通的蟲蟲給我個QQ吧,平時好請教啊。感謝。。。”热缦旅孢@個,我做的標曲是在v=1的時候做的(C8,紫外,乙腈:水=2:1),結果跑出來峰(t=1.54,v=1)沒有分開,不知道怎么積分,后來把流速調(diào)低至0.7和0.5,感覺積出來的峰面積也不會準,感覺把雜峰的面積也積進去了。求QQ,求賜教!

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badgv

新蟲 (初入文壇)



小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包,謝謝回帖
你就不在同一個條件下進一針空白看下先嗎?先確定空白溶劑鋒的位置情況啊
25樓2013-05-03 15:39:58
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普通回帖

staffyujay

銀蟲 (小有名氣)


★ ★
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包,謝謝回帖
chenhw06: 金幣+1 2013-05-02 16:58:18
這么早出峰不是都和溶劑峰混在一起了,而且響應也不高啊~這是溶劑峰吧。。。。
2樓2013-05-02 16:45:58
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chenhw06

金蟲 (正式寫手)


引用回帖:
2樓: Originally posted by staffyujay at 2013-05-02 16:45:58
這么早出峰不是都和溶劑峰混在一起了,而且響應也不高啊~這是溶劑峰吧。。。。

不是吧,保留就是比較弱的,之前測的標樣就是出峰很快。。。
3樓2013-05-02 16:49:56
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thankroc91

金蟲 (正式寫手)


★ ★ ★
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包,謝謝回帖
chenhw06: 金幣+2 2013-05-02 17:03:54
響應值很大,不知波長多少?保留時間靠前考慮鹵素離子峰
這樣這能手動積分,平行性看你自己功力了,
如果波長合適,流動相增加緩沖鹽。。調(diào)整至接近待測溶液PH或者緩沖鹽溶配
4樓2013-05-02 16:58:31
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chenhw06

金蟲 (正式寫手)


引用回帖:
4樓: Originally posted by thankroc91 at 2013-05-02 16:58:31
響應值很大,不知波長多少?保留時間靠前考慮鹵素離子峰
這樣這能手動積分,平行性看你自己功力了,
如果波長合適,流動相增加緩沖鹽。。調(diào)整至接近待測溶液PH或者緩沖鹽溶配

278nm,我的樣里面不含鹵素離子。后面的我就看不太懂了,想問問0.5的那個算分開了嗎?流速為1的手動積分有問題嗎?
5樓2013-05-02 17:03:43
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chenhw06

金蟲 (正式寫手)


吃飯去了,蟲蟲們的幫幫忙嘛
6樓2013-05-02 17:17:13
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swallow13

禁蟲 (正式寫手)

★ ★
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包,謝謝回帖
chenhw06: 金幣+1 2013-05-02 23:32:56
本帖內(nèi)容被屏蔽

7樓2013-05-02 17:38:12
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chenhw06

金蟲 (正式寫手)


引用回帖:
7樓: Originally posted by swallow13 at 2013-05-02 17:38:12
液相方法有問題 五個峰之間沒有分開 篩選一下方法吧

篩選方法。。。吐血了。。,是流速、溫度、流動相這幾方面調(diào)試嗎?能不能給個QQ哪,假如不介意的話。
8樓2013-05-02 18:35:34
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餓到天明

金蟲 (正式寫手)


★ ★ ★
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包,謝謝回帖
chenhw06: 金幣+2 2013-05-02 21:03:48
進樣濃度太高了,峰都平頭了,你的儀器不能走梯度么?恒流分相近的雜質(zhì)沒有優(yōu)勢,峰又寬,分離度又不好。你可以把結構式發(fā)出來看看。該用什么流動相和柱子
9樓2013-05-02 19:12:43
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chenhw06

金蟲 (正式寫手)


引用回帖:
9樓: Originally posted by 餓到天明 at 2013-05-02 19:12:43
進樣濃度太高了,峰都平頭了,你的儀器不能走梯度么?恒流分相近的雜質(zhì)沒有優(yōu)勢,峰又寬,分離度又不好。你可以把結構式發(fā)出來看看。該用什么流動相和柱子

可以走梯度,只是我沒有走過,液相剛買來沒太久,實驗室的的都不是很懂。我的目標物是第一個峰啊,濃度已經(jīng)很低了,查閱文獻都只是說到用的是C8柱,具體條件沒有說。前面兩個大峰應該就是這兩個東西了,同分異構體。

DPA.jpg



未命名.jpg

10樓2013-05-02 19:49:13
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zly86

鐵桿木蟲 (正式寫手)


★ ★ ★
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包,謝謝回帖
chenhw06: 金幣+2 2013-05-02 21:04:13
保留太弱了,需要增加保留,將樣品峰和系統(tǒng)峰分開才能做定量結果,否則是不準確的。
增加保留的方法:
1.降低流動相中乙腈含量,你的乙腈含量太高(66.7%),試試從5%到50%乙腈,30分鐘的梯度,另外,建議不要用純水,用0.1%FA做弱洗脫劑,你的樣品中含酚羥基,水做流動相或許會出現(xiàn)拖尾等情況;
2.換C18柱試試,疏水性強的多。
11樓2013-05-02 20:58:21
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chenhw06

金蟲 (正式寫手)


引用回帖:
11樓: Originally posted by zly86 at 2013-05-02 20:58:21
保留太弱了,需要增加保留,將樣品峰和系統(tǒng)峰分開才能做定量結果,否則是不準確的。
增加保留的方法:
1.降低流動相中乙腈含量,你的乙腈含量太高(66.7%),試試從5%到50%乙腈,30分鐘的梯度,另外,建議不要用純 ...

好的,我明天做一個梯度試試去,不過我看的所有文獻都是C8,要改嗎??
12樓2013-05-02 21:06:09
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mayanshun

金蟲 (小有名氣)


★ ★ ★
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包,謝謝回帖
chenhw06: 金幣+2 2013-05-02 23:32:36
你的樣品極性很大,而分離模式是反相色譜,從而樣品幾乎沒有保留。流速改變效果不佳。建議:仍然采用C8,而流動相中添加三氟乙酸或醋酸,抑制樣品的電離;或采用陰離子交換色譜模式分離分析。
13樓2013-05-02 22:27:36
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chenhw06

金蟲 (正式寫手)


引用回帖:
13樓: Originally posted by mayanshun at 2013-05-02 22:27:36
你的樣品極性很大,而分離模式是反相色譜,從而樣品幾乎沒有保留。流速改變效果不佳。建議:仍然采用C8,而流動相中添加三氟乙酸或醋酸,抑制樣品的電離;或采用陰離子交換色譜模式分離分析。

大家意見都好不一樣哦,看來我要多嘗試幾次啦。謝謝哦~~
14樓2013-05-02 23:32:29
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huihui2255365

金蟲 (小有名氣)



小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包,謝謝回帖
先把乙腈比例調(diào)小點吧~出峰時間晚點估計就能把峰分開~再不然有長柱的話換根長駐試試。。
15樓2013-05-03 08:41:31
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chenhw06

金蟲 (正式寫手)


引用回帖:
15樓: Originally posted by huihui2255365 at 2013-05-03 08:41:31
先把乙腈比例調(diào)小點吧~出峰時間晚點估計就能把峰分開~再不然有長柱的話換根長駐試試。。

在嘗試了,不知道可不可行呀
16樓2013-05-03 10:33:19
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趙明東

銅蟲 (正式寫手)



小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包,謝謝回帖
我的建議也是把溶劑比適當?shù)母囊幌拢嘣噹讉不同的溶劑比。這種峰分不開,就是溶劑比不合適,保留時間集中在一起了。再不行再試其他的加緩沖溶液啥的。。
17樓2013-05-03 11:17:44
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govern1988

銀蟲 (小有名氣)



小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包,謝謝回帖
把乙腈比例調(diào)小點,走梯度
18樓2013-05-03 11:22:36
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govern1988

銀蟲 (小有名氣)


然后再加添加劑,你這個化合物是酸性的,適當加甲酸或者乙酸調(diào)節(jié)PH值
19樓2013-05-03 11:24:10
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liuhailong37

鐵蟲 (小有名氣)



小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包,謝謝回帖
建議調(diào)整色譜條件,流動相比例,個人認為最好換一下其他流動相,調(diào)調(diào)ph試一下
20樓2013-05-03 11:50:14
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chenhw06

金蟲 (正式寫手)


引用回帖:
11樓: Originally posted by zly86 at 2013-05-02 20:58:21
保留太弱了,需要增加保留,將樣品峰和系統(tǒng)峰分開才能做定量結果,否則是不準確的。
增加保留的方法:
1.降低流動相中乙腈含量,你的乙腈含量太高(66.7%),試試從5%到50%乙腈,30分鐘的梯度,另外,建議不要用純 ...

這個是用乙腈和水1:1做的,看是不是可以了?分的可以嗎?還要走梯度嗎?

1比1.png



2比1.png

21樓2013-05-03 14:44:59
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chenhw06

金蟲 (正式寫手)


引用回帖:
20樓: Originally posted by liuhailong37 at 2013-05-03 11:50:14
建議調(diào)整色譜條件,流動相比例,個人認為最好換一下其他流動相,調(diào)調(diào)ph試一下

看看我用乙腈和水1:1走的是不是可以?還需要繼續(xù)改條件優(yōu)化嗎?
22樓2013-05-03 14:46:12
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chenhw06

金蟲 (正式寫手)


引用回帖:
19樓: Originally posted by govern1988 at 2013-05-03 11:24:10
然后再加添加劑,你這個化合物是酸性的,適當加甲酸或者乙酸調(diào)節(jié)PH值

看看我用乙腈和水1:1走的是不是可以?還需要繼續(xù)改條件優(yōu)化嗎?下圖
23樓2013-05-03 14:46:25
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chenhw06

金蟲 (正式寫手)


引用回帖:
17樓: Originally posted by 趙明東 at 2013-05-03 11:17:44
我的建議也是把溶劑比適當?shù)母囊幌,多試幾個不同的溶劑比。這種峰分不開,就是溶劑比不合適,保留時間集中在一起了。再不行再試其他的加緩沖溶液啥的。。

看看我用乙腈和水1:1走的是不是可以?還需要繼續(xù)改條件優(yōu)化嗎?見下圖
24樓2013-05-03 14:46:37
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jixfeng

木蟲 (正式寫手)



小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包,謝謝回帖
引用回帖:
2樓: Originally posted by staffyujay at 2013-05-02 16:45:58
這么早出峰不是都和溶劑峰混在一起了,而且響應也不高啊~這是溶劑峰吧。。。。

單位是AU哦 很高了 第一張都過載了
26樓2013-05-03 16:09:43
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chenhw06

金蟲 (正式寫手)


引用回帖:
26樓: Originally posted by jixfeng at 2013-05-03 16:09:43
單位是AU哦 很高了 第一張都過載了...

那表示1:1可行?
27樓2013-05-03 16:20:22
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jixfeng

木蟲 (正式寫手)



小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包,謝謝回帖
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21樓: Originally posted by chenhw06 at 2013-05-03 14:44:59
這個是用乙腈和水1:1做的,看是不是可以了?分的可以嗎?還要走梯度嗎?

1比1.png

2比1.png
...

加點鹽 酸性的 按百分比0.1~0.5% 加入 PH調(diào)節(jié)到3~5以下。試試 你不覺得你的峰都不是很尖銳么,就是解離的原因。  沒有全波長掃描檢測器 你又不走空白 實在無法對你的圖譜進行判斷。 反正比你一開始的好了。
28樓2013-05-03 16:20:23
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chenhw06

金蟲 (正式寫手)


引用回帖:
28樓: Originally posted by jixfeng at 2013-05-03 16:20:23
加點鹽 酸性的 按百分比0.1~0.5% 加入 PH調(diào)節(jié)到3~5以下。試試 你不覺得你的峰都不是很尖銳么,就是解離的原因。  沒有全波長掃描檢測器 你又不走空白 實在無法對你的圖譜進行判斷。 反正比你一開始的好了。...

有進行全波長掃描啊,不過沒有把圖發(fā)上來,要看嗎?要看我去復制去?還有那個最大的峰是苯酚,我之前有拿標品定性了,知道我要的峰出在什么位置,還要走空白嗎
29樓2013-05-03 16:26:00
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zly86

鐵桿木蟲 (正式寫手)



小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包,謝謝回帖
引用回帖:
12樓: Originally posted by chenhw06 at 2013-05-02 21:06:09
好的,我明天做一個梯度試試去,不過我看的所有文獻都是C8,要改嗎??...

文獻都做完了,你還做個啥?
30樓2013-05-03 18:18:20
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zly86

鐵桿木蟲 (正式寫手)


引用回帖:
12樓: Originally posted by chenhw06 at 2013-05-02 21:06:09
好的,我明天做一個梯度試試去,不過我看的所有文獻都是C8,要改嗎??...

盡信書,不如無書
31樓2013-05-03 18:18:42
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zly86

鐵桿木蟲 (正式寫手)



小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包,謝謝回帖
引用回帖:
14樓: Originally posted by chenhw06 at 2013-05-02 23:32:29
大家意見都好不一樣哦,看來我要多嘗試幾次啦。謝謝哦~~...

你就要看你的甄別能力了
32樓2013-05-03 18:22:34
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chenhw06

金蟲 (正式寫手)


引用回帖:
32樓: Originally posted by zly86 at 2013-05-03 18:22:34
你就要看你的甄別能力了...

接觸液相不久啊,剛學會怎么操作,具體不怎么了解。文獻上也只是提到用的是C8柱,具體沒有提啊。唉。。。。。好煩
33樓2013-05-03 18:45:14
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jixfeng

木蟲 (正式寫手)



小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包,謝謝回帖
引用回帖:
33樓: Originally posted by chenhw06 at 2013-05-03 18:45:14
接觸液相不久啊,剛學會怎么操作,具體不怎么了解。文獻上也只是提到用的是C8柱,具體沒有提啊。唉。。。。。好煩...

不知你現(xiàn)在的結果如何了 其實大家的意見都是相似的 你的條件不行 連“湊活”都不行 你把流動相調(diào)到1:1后 效果提高了很多(粗看可以湊活了) “貌似”各峰基線分離了 但基線分離就是好的方法了? 是否有峰沒有跑出 是否有峰過寬沒有顯示 是否還有峰包含 等等 還有看你的圖 你是在做反應 走的反應液? 如果是的話 可以保證重現(xiàn)性的話 你就把1:1做中控方法好了(除了保留時間稍短)。上面?zhèn)人提供的檢查方法為以后調(diào)整保留
34樓2013-05-06 13:36:33
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chenhw06

金蟲 (正式寫手)


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34樓: Originally posted by jixfeng at 2013-05-06 13:36:33
不知你現(xiàn)在的結果如何了 其實大家的意見都是相似的 你的條件不行 連“湊活”都不行 你把流動相調(diào)到1:1后 效果提高了很多(粗看可以湊活了) “貌似”各峰基線分離了 但基線分離就是好的方法了? 是否有峰沒有跑出  ...

我確實走的我的反應液,我感覺我要的峰確實都已經(jīng)跑出來,就是分離度確實不是很好,可以問一下,中控方法是什么意思嗎?不懂哪
35樓2013-05-06 15:48:30
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