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北京石油化工學(xué)院2026年研究生招生接收調(diào)劑公告

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仙劍問情1203

銅蟲 (小有名氣)

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[求助] 關(guān)于硅膠柱層析

各位大俠們，幫幫忙啊，我最近在做蛙皮中甾體部分分離的試驗(yàn)，我是濕法上樣的，樣品是深黃色的，我打算用石油醚和乙酸乙酯梯度洗脫，可是已經(jīng)沖了一個(gè)梯度了，樣品的那個(gè)黃色還在最上面，就下來了大約3厘米吧，這正常嗎？是不是所有梯度都洗脫完，黃色才能跑到最下面��？還是其他原因？還有洗脫劑的體積怎么算的啊？

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1樓 2013-05-03 14:34:05

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wm0629

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很正常啊，如果你只想要那個(gè)黃色的部分，可能是你給的極性不夠，換個(gè)極性稍大一點(diǎn)的梯度走一下試試。不過梯度換的跨度不要太大，一是容易分不開，把別的東西一起洗下來。用石油醚乙酸乙酯走，樣品的極性應(yīng)該很小吧。你初始流動(dòng)相是多少�。�

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2樓2013-05-03 17:45:46

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3樓2013-05-03 18:49:47

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wangzm111

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甾體物質(zhì)極性大，過硅膠柱時(shí)可以先把硅膠加點(diǎn)水失活，或者在流動(dòng)相中加一定少量的水。

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4樓2013-05-03 19:35:46

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4樓: Originally posted by wangzm111 at 2013-05-03 19:35:46
甾體物質(zhì)極性大，過硅膠柱時(shí)可以先把硅膠加點(diǎn)水失活，或者在流動(dòng)相中加一定少量的水。

同意此樓說法，流動(dòng)相沒有選擇有點(diǎn)問題，極性不夠，可以調(diào)整流動(dòng)相。如果是梯度洗脫的話，開始走的慢也正常，換梯度再洗

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5樓2013-05-04 07:22:00

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2樓: Originally posted by wm0629 at 2013-05-03 17:45:46
很正常啊，如果你只想要那個(gè)黃色的部分，可能是你給的極性不夠，換個(gè)極性稍大一點(diǎn)的梯度走一下試試。不過梯度換的跨度不要太大，一是容易分不開，把別的東西一起洗下來。用石油醚乙酸乙酯走，樣品的極性應(yīng)該很小吧。 ...

我的初始流動(dòng)相是石油醚和乙酸乙酯5：1，接下來是3：1，1：1，1：3，1：5，現(xiàn)在第二個(gè)梯度要沖完了，可是那個(gè)黃色的一直沒怎么往下走，而且我把第一個(gè)梯度接的餾分跑了個(gè)薄層板子，幾乎沒什么東西，不知道是不是流動(dòng)相不合適啊。

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6樓2013-05-04 19:56:27

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6樓: Originally posted by 仙劍問情1203 at 2013-05-04 19:56:27
我的初始流動(dòng)相是石油醚和乙酸乙酯5：1，接下來是3：1，1：1，1：3，1：5，現(xiàn)在第二個(gè)梯度要沖完了，可是那個(gè)黃色的一直沒怎么往下走，而且我把第一個(gè)梯度接的餾分跑了個(gè)薄層板子，幾乎沒什么東西，不知道是不是流 ...

應(yīng)該是極性不夠吧，你再換個(gè)大點(diǎn)的極性走走試試。

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7樓2013-05-04 20:39:52

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樓上說的對，加大極性繼續(xù)洗脫。

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8樓2013-05-05 09:11:14

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tandongxing

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這個(gè)就是你的洗脫機(jī)極性不夠大了，你的增加極性，不過這個(gè)洗脫機(jī)極性你得事先用薄層摸好了，在你要的沒出來之前，可以用極性小的沖沖雜質(zhì)，你的那個(gè)黃色的色帶應(yīng)該很容易跑純的，多練習(xí)練習(xí)，就會(huì)掌握很多經(jīng)驗(yàn)

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9樓2013-05-05 09:57:12

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9樓: Originally posted by tandongxing at 2013-05-05 09:57:12
這個(gè)就是你的洗脫機(jī)極性不夠大了，你的增加極性，不過這個(gè)洗脫機(jī)極性你得事先用薄層摸好了，在你要的沒出來之前，可以用極性小的沖沖雜質(zhì)，你的那個(gè)黃色的色帶應(yīng)該很容易跑純的，多練習(xí)練習(xí)，就會(huì)掌握很多經(jīng)驗(yàn)

謝謝，現(xiàn)在跑下來東西了，但是一檢測上面一個(gè)點(diǎn)，下面一條帶狀，像這樣的話，是不是很難分出單體啊，我的目的就是分出單體啊

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10樓2013-05-06 10:21:46

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