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[交流]
關(guān)于離子交換再生的問題!疑惑。。 已有3人參與
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DEAE Sepharose FF用了很久了,但有個問題一直想不明白。 我是用來分離蛋白質(zhì)的,通常緩沖液pH8.5-9.0,讓蛋白質(zhì)帶負電,結(jié)合后用NaCl洗脫,之后是再生,通常用高濃度的NaCl或低濃度的NaOH洗脫。 問題是:用NaCl或NaOH再生時,Cl-t和OH-離子已經(jīng)和交換基團結(jié)合滿了,再上樣蛋白質(zhì)時怎么又能和蛋白質(zhì)結(jié)合呢?可能是蛋白質(zhì)結(jié)合能力強吧。如果是蛋白質(zhì)結(jié)合能力強,那怎么又能用NaCl或NaOH洗脫下來呢? 疑惑啊! |
專家顧問 (知名作家)
生物大分子降解酶
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