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doubleping新蟲 (小有名氣)
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pcr-dgge分析土壤微生物群落要做平行樣嗎?
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| pcr-dgge分析土壤微生物群落要做平行樣嗎?我們實(shí)驗(yàn)室采的土樣都有三個(gè)重復(fù)處理,我做pcr-dgge實(shí)驗(yàn)也是三個(gè)重復(fù)樣品都做嗎?做dgge時(shí)候是三個(gè)平行樣并列排在一起嗎?數(shù)據(jù)分析時(shí)候怎么辦?是都要分析還是取平均值?不好意思,我知道這問(wèn)題很淺顯,但是原諒我是我們學(xué)校第一個(gè)做pcr-dgge的,沒人帶著,而且我們?cè)阂矝]人做微生物,自己也沒有微生物基礎(chǔ),所以指望大家啦,十二萬(wàn)分感謝 |
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一般不需要做平行。 既然你們已經(jīng)坐了3個(gè)重復(fù)樣品取樣,那可以將3個(gè)重復(fù)樣本分別取部分樣本混合后提取DNA作為該樣本進(jìn)行DGGE實(shí)驗(yàn)。這樣也可以彌補(bǔ)取樣時(shí)可能導(dǎo)致的微生物分布不均的問(wèn)題。 當(dāng)然,如果你的樣本數(shù)目不是特別多,分為3個(gè)重復(fù)樣本跑DGGE也是可以的。 |
| 土壤微生物群落結(jié)構(gòu)很難說(shuō),有時(shí)候比較麻煩。同一個(gè)土樣的三個(gè)重復(fù)有時(shí)候提完DNA做PCR-DGGE也會(huì)有很大變化,如果你的三個(gè)重復(fù)土樣來(lái)自一塊田的話,建議你混合之后提一個(gè)DNA,如果是一個(gè)處理,三個(gè)小區(qū)里分別采了一個(gè)土樣的話,那就一份土樣提一個(gè)DNA~ |
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