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zhea1057d新蟲(chóng) (初入文壇)
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[交流]
TALENs打靶后檢測(cè)問(wèn)題 已有2人參與
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| 嘗試做TALENs打靶后是否引起突變的實(shí)驗(yàn)，打靶spacer中有PstI識(shí)別位點(diǎn)，若引起突變，很可能該位點(diǎn)不再被識(shí)別。設(shè)計(jì)了巢式PCR，并做了兩種不同策略做陰性對(duì)照樣本（wide type基因組），第一種:酶切基因組DNA，再做兩輪PCR；第二種：未酶切基因組DNA，做第一輪PCR后酶切，再做nested PCR。結(jié)果是兩種方案陰性樣本都出現(xiàn)很亮的條帶，大小與未酶切的PCR產(chǎn)物片段一致。請(qǐng)教是哪里出了問(wèn)題，還是這個(gè)方案不可行？非常感謝！ |
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bullfrog325
木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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2樓2013-05-11 00:22:02
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3樓2013-05-11 21:17:24
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