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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » 綜合其他 » TALENs打靶后檢測問題
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TALENs打靶后檢測問題 已有2人參與
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| 嘗試做TALENs打靶后是否引起突變的實驗，打靶spacer中有PstI識別位點，若引起突變，很可能該位點不再被識別。設計了巢式PCR，并做了兩種不同策略做陰性對照樣本（wide type基因組），第一種:酶切基因組DNA，再做兩輪PCR；第二種：未酶切基因組DNA，做第一輪PCR后酶切，再做nested PCR。結果是兩種方案陰性樣本都出現(xiàn)很亮的條帶，大小與未酶切的PCR產(chǎn)物片段一致。請教是哪里出了問題，還是這個方案不可行？非常感謝！ |
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3樓2013-05-11 21:17:24
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