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全長基因表達(dá)，關(guān)于酶切位點，關(guān)于ORF
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| 我拿到的基因有2700bp左右，ORF大概在500-1900這個位置。我想表達(dá)這個基因，我該如何設(shè)計上下游引物，離ORF外測多遠(yuǎn)？還是越近越好？再弱弱的問一句：酶切位點是目的序列上本來就有還是設(shè)計引物的時候認(rèn)為加上去的？ |
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3樓2013-05-10 09:32:11
新人小玥
木蟲 (正式寫手)
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【答案】應(yīng)助回帖
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您是什么意思？表達(dá)基因？完整的基因？ 若是完整的基因，當(dāng)然是整個ORF全長啦。從ATG到終止密碼子這全部。就卡這一段，堿基必須一個不多一個不少。 在這，您這酶切位點是用來干嘛的？若是為以后連載體用的，就是在加在引物的5‘端之前。具體的方法你找找酶切引物設(shè)計方面的資料，上面肯定很詳細(xì)的介紹如何設(shè)計。別忘了加保護(hù)堿基。。。  |
2樓2013-05-09 23:10:19
zhaolf
木蟲 (著名寫手)
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4樓2013-05-10 10:35:49
5樓2013-05-10 11:12:00
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