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小數(shù)碼植物新蟲 (初入文壇)
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[求助]
請(qǐng)教APX和CAT活性測(cè)定過(guò)程中的一些奇怪問(wèn)題
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近期在做2種花卉的抗氧化酶活性,是3個(gè)比較常規(guī)基礎(chǔ)的酶活:APX、CAT和POD,出現(xiàn)了一些不好解決的問(wèn)題,請(qǐng)教大家。 APX、CAT的測(cè)定中,植物材料A的測(cè)定很順利,重復(fù)性好,數(shù)值也處在一個(gè)合理的范圍;但同樣的體系中,植物B的問(wèn)題不小。當(dāng)將B的酶液放進(jìn)分光光度計(jì)測(cè)量其活性動(dòng)力學(xué)曲線的斜率時(shí),曲線出現(xiàn)兩個(gè)問(wèn)題:(1)并非是平滑的下降曲線,而是上下波動(dòng)特別嚴(yán)重,毫無(wú)規(guī)律,就像心電圖似的。無(wú)論是跑5s、10s、25s、30s還是60s,最終的斜率值完全取決于曲線波動(dòng)最后一下子是上升還是下降,偶然性太強(qiáng)。所以曲線斜率值應(yīng)當(dāng)是負(fù)值的APX和CAT,常常會(huì)因?yàn)樽詈笠淮吻是上升波動(dòng)而呈現(xiàn)正值。重復(fù)性就不用說(shuō)了,爛的很。(2)曲線斜率值非常小,常常是小數(shù)點(diǎn)后第三第四位才有數(shù)值,這樣的數(shù)值一般是不正確的。 前面說(shuō)過(guò)是兩種花卉,B在APX和CAT中出現(xiàn)這種問(wèn)題,A很好;但在POD的測(cè)量中,B很好,材料A卻出現(xiàn)了類似問(wèn)題。究竟是什么原因呢?——估計(jì)可能是反應(yīng)體系會(huì)因材料的不同而要進(jìn)行調(diào)整,但文獻(xiàn)中一般不會(huì)在具體的配試劑、用量多少、加試劑多少毫升上面寫的那么細(xì)致。做了幾次試驗(yàn)都是這種結(jié)果,在這里請(qǐng)教各位達(dá)人可能的原因是什么。 |
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