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小數(shù)碼植物新蟲 (初入文壇)
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[求助]
請教APX和CAT活性測定過程中的一些奇怪問題
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近期在做2種花卉的抗氧化酶活性，是3個比較常規(guī)基礎的酶活：APX、CAT和POD，出現(xiàn)了一些不好解決的問題，請教大家。 APX、CAT的測定中，植物材料A的測定很順利，重復性好，數(shù)值也處在一個合理的范圍；但同樣的體系中，植物B的問題不小。當將B的酶液放進分光光度計測量其活性動力學曲線的斜率時，曲線出現(xiàn)兩個問題：（1）并非是平滑的下降曲線，而是上下波動特別嚴重，毫無規(guī)律，就像心電圖似的。無論是跑5s、10s、25s、30s還是60s，最終的斜率值完全取決于曲線波動最后一下子是上升還是下降，偶然性太強。所以曲線斜率值應當是負值的APX和CAT，常常會因為最后一次曲線是上升波動而呈現(xiàn)正值。重復性就不用說了，爛的很。（2）曲線斜率值非常小，常常是小數(shù)點后第三第四位才有數(shù)值，這樣的數(shù)值一般是不正確的。 前面說過是兩種花卉，B在APX和CAT中出現(xiàn)這種問題，A很好；但在POD的測量中，B很好，材料A卻出現(xiàn)了類似問題。究竟是什么原因呢？——估計可能是反應體系會因材料的不同而要進行調(diào)整，但文獻中一般不會在具體的配試劑、用量多少、加試劑多少毫升上面寫的那么細致。做了幾次試驗都是這種結(jié)果，在這里請教各位達人可能的原因是什么。 |
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2樓2022-02-27 21:07:35
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