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[求助]
蛋白純化
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| 近來(lái)純化蛋白，深受打擊。將目的基因轉(zhuǎn)入載體pET-21b后，在宿主細(xì)胞BL21中進(jìn)行原核表達(dá)。經(jīng)過(guò)誘導(dǎo)后收集菌體，超聲波破碎，目的蛋白在上清中有一定的表達(dá)量，但沉淀中也存在（我認(rèn)為超聲破碎不完全）。采用BBI家的Ni-NTA預(yù)裝柱進(jìn)行純化，pH8.0 0-500mM的咪唑溶液進(jìn)行梯度洗脫，雜蛋白與目的蛋白均在100mM時(shí)被洗脫下來(lái)，是為什么呢？？？求助！�。� |
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5樓2013-05-17 12:20:46
cicelyzh
鐵桿木蟲 (職業(yè)作家)
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- 專業(yè): 生物化學(xué)
2樓2013-05-16 12:25:02
qianshengguo
銅蟲 (小有名氣)
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- 專業(yè): 蛋白質(zhì)組學(xué)
3樓2013-05-17 10:45:57
4樓2013-05-17 12:17:57
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