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小小佐羅2木蟲 (正式寫手)
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[求助]
做過細菌表面疏水性和自凝集試驗的大神給點指導 已有2人參與
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本人正在做一些益生菌菌株的表面疏水性和自凝集試驗，本以為比較簡單，但是做出來結果明顯不對，我把我做的步驟寫下來，大家給指導下到底哪里出了問題。 表面疏水性：1、將過夜培養(yǎng)菌液12000rpm離心5分鐘，然后用生理鹽水洗2次，每次加5ml生理鹽水； 2、洗好的菌用生理鹽水調(diào)到OD600 大約0.6左右； 3、取3ml調(diào)好OD的菌液+0.6ml二甲苯，渦旋儀震蕩90s，然后放置15min； 4、用槍將上層二甲苯全部吸走，然后測下層水相的OD600值。 但是每次測后面水相的OD值都比之前沒加二甲苯的還要大，而且上層二甲苯明顯也沒看到菌融到里面去，看了很多文獻都會測出一個值，我這樣算出來就是負值了，做了很多菌（40株左右了），結果都是后面比前面大，看的文獻里面人家都能測出有表面疏水性只是大小的問題。不知道問題出在那里了，請大神指導下。 自凝集試驗：1、將過夜培養(yǎng)菌液12000rpm離心5分鐘，然后用生理鹽水洗2次，每次加5ml生理鹽水； 2、洗好的菌用生理鹽水調(diào)到OD600 大約0.25左右； 3、室溫放置20h； 4、文獻上說這時候測定菌液的OD，這塊我就搞不明白了，放置20h后就會出現(xiàn)分層現(xiàn)象，這時候到底吸那一部分來測OD那？ 這2個問題糾結了很久，希望各位能給與指點，謝謝！ |
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