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如果一個外源基因?qū)毦卸拘裕绾螛?gòu)建過表達載體/回補載體
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| 我有個2700bp的擬南芥基因,已經(jīng)構(gòu)建到KS+上并且測序成功了,雙酶切(PstI和SalI)后連接到1301S2上做過表達卻怎么也連不上,我自己做了十幾次,找別人幫忙做了3次也做不出來,每次都是一個克隆都沒有;后來找公司做,公司也重復了4次,有很多克隆,但是都是假陽性,一個陽性克隆都沒有。會不會是這個基因?qū)毦卸拘阅?如果是的話,要如何?gòu)建過表達載體/回補載體呢?(這個基因用BamHI和XhoI連PBI121也是這種情況) |
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