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盧爾夏鐵蟲 (初入文壇)
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[求助]
如果一個(gè)外源基因?qū)?xì)菌有毒性，如何構(gòu)建過表達(dá)載體/回補(bǔ)載體
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| 我有個(gè)2700bp的擬南芥基因，已經(jīng)構(gòu)建到KS+上并且測序成功了，雙酶切（PstI和SalI）后連接到1301S2上做過表達(dá)卻怎么也連不上，我自己做了十幾次，找別人幫忙做了3次也做不出來，每次都是一個(gè)克隆都沒有；后來找公司做，公司也重復(fù)了4次，有很多克隆，但是都是假陽性，一個(gè)陽性克隆都沒有。會不會是這個(gè)基因?qū)?xì)菌有毒性呢？如果是的話，要如何構(gòu)建過表達(dá)載體/回補(bǔ)載體呢？（這個(gè)基因用BamHI和XhoI連PBI121也是這種情況） |
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盧爾夏
鐵蟲 (初入文壇)
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