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madrid75木蟲 (小有名氣)
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[求助]
關(guān)于葡萄糖生成實驗
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最近在做HepG2細(xì)胞的葡萄糖生成實驗（glucose production/output assay）。實驗步驟是，細(xì)胞以1.5*10E6接入6孔板，使用含地塞米松（500nM）和Bt2-cAMP（100uM）的無血清MEM培養(yǎng)基處理5小時，再換用含20mM乳酸鈉，2mM丙酮酸鈉和15mM Hepes的DMEM（不含糖和酚紅）培養(yǎng)基處理3小時。最后用sigma的葡萄糖氧化法試劑盒檢查培養(yǎng)基中的糖濃度。結(jié)果是不能檢查到葡萄糖。不知道問題出在什么地方，請大家指點(diǎn)！ 另外，我也試過刺激（地塞米松等）時間延長到24小時，再換生糖培養(yǎng)基（處理3-6小時），或不使用藥物刺激直接換生糖培養(yǎng)基處理3-6小時，結(jié)果也都是檢查不到葡萄糖。 |
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dongxie1982
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2樓2013-05-26 10:09:55
madrid75
木蟲 (小有名氣)
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3樓2013-05-27 10:37:17
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