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秦運(yùn)杰223銅蟲 (正式寫手)
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免疫共沉淀---免疫復(fù)合物最后分離
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| 免疫共沉淀與免疫沉淀有什么區(qū)別？另外免疫共沉淀 的實(shí)驗(yàn)原理前面的基本都理解可是到最后抗原抗體復(fù)合物與免疫磁珠Protein A/G結(jié)合后怎么只把抗原洗脫掉，使抗原與抗體分離？免疫沉淀試驗(yàn)本實(shí)驗(yàn)室里沒(méi)有人做過(guò)，東西也都沒(méi)有，目前正在做準(zhǔn)備工作，還請(qǐng)蟲友們多多指教，包括實(shí)驗(yàn)步驟，注意事項(xiàng)要求等等，謝謝大家!! |
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myfinalway
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2樓2013-06-01 15:44:33
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【答案】應(yīng)助回帖
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免疫共沉淀與免疫沉淀有什么區(qū)別？ --> 假設(shè)有A,B兩個(gè)蛋白,免疫共沉淀是指通過(guò)A抗體把B富集出來(lái)(如果A, B可以互作). 免疫沉淀是指用A抗體富集A. 另外免疫共沉淀 的實(shí)驗(yàn)原理前面的基本都理解可是到最后抗原抗體復(fù)合物與免疫磁珠Protein A/G結(jié)合后怎么只把抗原洗脫掉，使抗原與抗體分離？ --> 看你的后續(xù)試驗(yàn)步驟, 有用酸性緩沖液的. 如果是做WB的話, 有時(shí)你甚至可以直接用SDS. 免疫沉淀試驗(yàn)本實(shí)驗(yàn)室里沒(méi)有人做過(guò)，東西也都沒(méi)有，目前正在做準(zhǔn)備工作，還請(qǐng)蟲友們多多指教，包括實(shí)驗(yàn)步驟，注意事項(xiàng)要求等等，謝謝大家!! --> 第一次做的話, 先要搞清楚 1), 抗體可不可以用, 2), 抗體特異性是否達(dá)標(biāo), 3) 蛋白在操作過(guò)程中會(huì)不會(huì)降解. 這幾點(diǎn)對(duì)試驗(yàn)結(jié)果的判斷很重要. 建議一些關(guān)鍵的步驟后面都留一點(diǎn)樣品以便分析. |
3樓2013-06-01 16:14:28
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