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秦運杰223銅蟲 (正式寫手)
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[求助]
免疫共沉淀---免疫復合物最后分離
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| 免疫共沉淀與免疫沉淀有什么區(qū)別?另外免疫共沉淀 的實驗原理前面的基本都理解可是到最后抗原抗體復合物與免疫磁珠Protein A/G結合后怎么只把抗原洗脫掉,使抗原與抗體分離?免疫沉淀試驗本實驗室里沒有人做過,東西也都沒有,目前正在做準備工作,還請蟲友們多多指教,包括實驗步驟,注意事項要求等等,謝謝大家!! |

木蟲 (正式寫手)
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免疫共沉淀與免疫沉淀有什么區(qū)別? --> 假設有A,B兩個蛋白,免疫共沉淀是指通過A抗體把B富集出來(如果A, B可以互作). 免疫沉淀是指用A抗體富集A. 另外免疫共沉淀 的實驗原理前面的基本都理解可是到最后抗原抗體復合物與免疫磁珠Protein A/G結合后怎么只把抗原洗脫掉,使抗原與抗體分離? --> 看你的后續(xù)試驗步驟, 有用酸性緩沖液的. 如果是做WB的話, 有時你甚至可以直接用SDS. 免疫沉淀試驗本實驗室里沒有人做過,東西也都沒有,目前正在做準備工作,還請蟲友們多多指教,包括實驗步驟,注意事項要求等等,謝謝大家!! --> 第一次做的話, 先要搞清楚 1), 抗體可不可以用, 2), 抗體特異性是否達標, 3) 蛋白在操作過程中會不會降解. 這幾點對試驗結果的判斷很重要. 建議一些關鍵的步驟后面都留一點樣品以便分析. |
木蟲 (正式寫手)
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