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關(guān)于分子吸光系數(shù)和吸光值求濃度的問(wèn)題,急急急
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| 給出一個(gè)分子吸光系數(shù),單位是L/(mol·cm)。另外知道吸光值。怎么計(jì)算濃度啊。比如:使用分子吸光系數(shù)22000L/(mol·cm)計(jì)算羰基含量(nmol/mg MPI)。(一篇文獻(xiàn)中的)取的是取1mL質(zhì)量濃度為2mg/mL的蛋白溶液。吸光值比如說(shuō)是0.5.怎么計(jì)算含量? |

版主 (文學(xué)泰斗)

至尊木蟲(chóng) (文壇精英)
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以蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度(可購(gòu)買(mǎi),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)稍昂貴)為橫坐標(biāo),以吸光度為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 計(jì)算出回歸方程 Y=aX+b 把待測(cè)樣品的吸光值代入回歸方程,算出待測(cè)樣品濃度。 根據(jù)比爾定律,吸光度A與吸光物質(zhì)的濃度c和吸收池光程長(zhǎng)b的乘積成正比。當(dāng)c的單位為g/L,b的單位為cm時(shí),則 A = abc,比例系數(shù)a稱(chēng)為吸收系數(shù),單位為L(zhǎng)/g.cm;當(dāng)c的單位為mol/L,b的單位為cm時(shí),則 A = εbc,比例系數(shù)ε稱(chēng)為摩爾吸收系數(shù),單位為L(zhǎng)/mol.cm,數(shù)值上ε等于a與吸光物質(zhì)的摩爾質(zhì)量的乘積。它的物理意義是:當(dāng)吸光物質(zhì)的濃度為1 mol/L,吸收池厚為1cm,以一定波長(zhǎng)的光通過(guò)時(shí),所引起的吸光度值A(chǔ)。ε值取決于入射光的波長(zhǎng)和吸光物質(zhì)的吸光特性,亦受溶劑和溫度的影響。顯然,顯色反應(yīng)產(chǎn)物的ε值愈大,基于該顯色反應(yīng)的光度測(cè)定法的靈敏度就愈高。 摩爾吸收系數(shù)=百分吸收系數(shù)*M/10=100*100/10=1000 |
至尊木蟲(chóng) (文壇精英)
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