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lingling1988銅蟲 (初入文壇)
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AFLP——聚丙烯酰胺凝膠電泳
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最近我用得到的雙酶切產(chǎn)物做了連接、預(yù)擴(kuò)和選擴(kuò),然后跑了一下變性膠,模板是相同的,第一個(gè)和最后一個(gè)都是MARKER(圖中看到的兩條帶是50bp和100bp),中間是24對不同的引物組合跑出的條帶。得到的結(jié)果如下圖,麻煩幫忙分析一下這次AFLP存在什么問題。謝謝~ 變性膠.jpg |
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你這個(gè)圖片我看起來有點(diǎn)問題,主要是你的預(yù)擴(kuò)增產(chǎn)物,預(yù)擴(kuò)增產(chǎn)物一般不會彌散得那么大的啊,我要2%瓊脂糖跑的時(shí)候,挺亮的啊,5ul上樣。 你的基因組質(zhì)量一般吧,但是濃度,OD值好的話,酶切也是沒有問題的。 連接產(chǎn)物一般是電泳看不到的。 你的預(yù)擴(kuò)增感覺不對.......太淡了.....應(yīng)該是比較濃的。 連接產(chǎn)物取多少去跑預(yù)擴(kuò)增。 |

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