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晨青小蟲銅蟲 (初入文壇)
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[求助]
ELISA檢測豬肉中的酪胺，怎樣充分除脂？
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我是做ELISA的，主要檢測新鮮肉及肉制品中的酪胺，目前需要做實際樣品了。發(fā)現(xiàn)基質(zhì)影響很難消除，（我是把1g肉用3ml甲醇做提取液，漩渦振蕩10分鐘，重復(fù)提兩次。合并上清液，正己烷除脂多次，棄去上層正己烷層，但是氮吹后用10mlPBS復(fù)溶后發(fā)現(xiàn)混濁，像是有脂肪，離心取上清，將樣品稀釋液稀釋到50倍，加入0.5%BSA掩蔽劑，作板，發(fā)現(xiàn)樣品稀釋液的control才0.6，不能與標(biāo)曲重合。） 用甲醇做提取液是考慮到標(biāo)品的溶解性問題，因為酪胺不溶于氯仿、不溶于乙酸乙酯等溶劑。而樣品稀釋50倍也是達(dá)到稀釋上限了，再稀釋的話檢測實際樣品的靈敏度就很低了。 正己烷、乙酸乙酯、石油醚等有機(jī)溶劑哪個除脂效果好？有哪位高人能指導(dǎo)我一下除脂的好方法，以消除基質(zhì)影響，不勝感激�。。� |
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2樓2013-06-17 19:56:42
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4樓2013-06-20 10:13:50
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6樓2014-05-05 10:32:23
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