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晨青小蟲銅蟲 (初入文壇)
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ELISA檢測(cè)豬肉中的酪胺,怎樣充分除脂?
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我是做ELISA的,主要檢測(cè)新鮮肉及肉制品中的酪胺,目前需要做實(shí)際樣品了。發(fā)現(xiàn)基質(zhì)影響很難消除,(我是把1g肉用3ml甲醇做提取液,漩渦振蕩10分鐘,重復(fù)提兩次。合并上清液,正己烷除脂多次,棄去上層正己烷層,但是氮吹后用10mlPBS復(fù)溶后發(fā)現(xiàn)混濁,像是有脂肪,離心取上清,將樣品稀釋液稀釋到50倍,加入0.5%BSA掩蔽劑,作板,發(fā)現(xiàn)樣品稀釋液的control才0.6,不能與標(biāo)曲重合。) 用甲醇做提取液是考慮到標(biāo)品的溶解性問題,因?yàn)槔野凡蝗苡诼确隆⒉蝗苡谝宜嵋阴サ热軇。而樣品稀?0倍也是達(dá)到稀釋上限了,再稀釋的話檢測(cè)實(shí)際樣品的靈敏度就很低了。 正己烷、乙酸乙酯、石油醚等有機(jī)溶劑哪個(gè)除脂效果好?有哪位高人能指導(dǎo)我一下除脂的好方法,以消除基質(zhì)影響,不勝感激!! |
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銅蟲 (初入文壇)
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