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changyi_23金蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
分泌蛋白
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| 我構(gòu)建了一種融合蛋白 前面加了信號(hào)肽 但是就是分泌不出來(lái) 但是此信號(hào)肽與其他蛋白構(gòu)建在一起 可以引導(dǎo)分泌 這是為什么呢 與什么的性質(zhì)有關(guān)呢？？？ |
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lomis
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【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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1.每種蛋白最適合的信號(hào)肽是不同的，目前還未有一種信號(hào)肽是適合所有蛋白分泌表達(dá)的，你可以嘗試一下其他信號(hào)肽。可參考：Optimization of Protease Secretion in Bacillus subtilis and Bacillus licheniformis by Screening of Homologous and Heterologous Signal Peptides 2. 蛋白本身性質(zhì)決定了其不可能分泌表達(dá)或者分泌表達(dá)量極少，這個(gè)一般多見(jiàn)于異源表達(dá)或者是膜蛋白和胞內(nèi)蛋白的異源表達(dá)。 這種情況怎么辦呢：1. 修改融合蛋白的可變?nèi)诤闲蛄�，如A+B融合表達(dá)，保留關(guān)鍵A部分，更換可替代B部分，使得整體蛋白活性如之前融合序列；2.更改表達(dá)菌株，如芽孢桿菌分泌不出來(lái)的可換酵母試試。3. 放棄分泌表達(dá)，改用胞內(nèi)表達(dá)策略。 |
2樓2013-06-26 16:27:12
changyi_23
金蟲(chóng) (小有名氣)
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3樓2013-06-27 08:27:16
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