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changyi_23金蟲 (小有名氣)
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[求助]
分泌蛋白
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| 我構建了一種融合蛋白 前面加了信號肽 但是就是分泌不出來 但是此信號肽與其他蛋白構建在一起 可以引導分泌 這是為什么呢 與什么的性質(zhì)有關呢??? |
木蟲 (正式寫手)
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1.每種蛋白最適合的信號肽是不同的,目前還未有一種信號肽是適合所有蛋白分泌表達的,你可以嘗試一下其他信號肽?蓞⒖迹篛ptimization of Protease Secretion in Bacillus subtilis and Bacillus licheniformis by Screening of Homologous and Heterologous Signal Peptides 2. 蛋白本身性質(zhì)決定了其不可能分泌表達或者分泌表達量極少,這個一般多見于異源表達或者是膜蛋白和胞內(nèi)蛋白的異源表達。 這種情況怎么辦呢:1. 修改融合蛋白的可變?nèi)诤闲蛄校鏏+B融合表達,保留關鍵A部分,更換可替代B部分,使得整體蛋白活性如之前融合序列;2.更改表達菌株,如芽孢桿菌分泌不出來的可換酵母試試。3. 放棄分泌表達,改用胞內(nèi)表達策略。 |

金蟲 (小有名氣)
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